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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
一年
- 英文名:
(Tri-n-butyl)-n-tetradecylphosphonium chloride
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- CAS号:
81741-28-8
- 规格:
500g
产品中文名称:(三丁基)正十四烷基氯化膦
产品英文名称: (Tri-n-butyl)-n-tetradecylphosphonium chloride
CAS号:81741-28-8
纯度级别:97%
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文献和实验1、蛋白质样品的特征:复杂,含盐或其他污染物易被蛋白酶降解动态范围宽(>X106)溶解性不均一(疏水性/亲水性)分子量、等电点的范围宽(10-500KDa,pH2-14)2、样品分离的基本要求:高灵敏度和分辨率宽动态范围小样品体积高通量合适的温度和pH避免蛋白酶降解适合与高灵敏度的质谱联用尽量少的操作步骤减少污染和损失3、样品缓冲液的组成:3.1 尿素:一种中性变性剂,破坏氨基酸残基之间的非共价键和离子键而不影响等电聚焦,浓度范围5-9.8mol/L,溶液不稳定,降解生成的氰酸根离子与蛋白
2-DE的成效,目标是尽可能扩大其溶解度和解聚,以提高分辨率。用化学法和机械裂解法破碎以尽可能溶解和解聚蛋白,两者联合有协同作用。对IEF(isoelectric focusing)样品的预处理涉及溶解、变性和还原来完全破坏蛋白间的相互作用,并除去如核酸等非蛋白物质。理想的状态是人们应一步完成蛋白的完全处理。而离液剂2mol/L硫脲和表面活性剂4%CHAPS的混合液促使疏水蛋白从IPG(immobilized pH gradients)胶上的转换。三丁基膦(Tributyl phosphine,TBP
pH gradients)胶上的转换.三丁基膦(Tributyl phosphine,TBP )取代β-巯基乙醇或DTT完全溶解链间或链内的二硫键,增强了蛋白的溶解度,并导致转至第二向的增加].两者通过不同的方法来增加蛋白的溶解度,作为互补试剂会更有效.在保持样品的完整性的前提下,可利用超离和核酸内切酶去除核酸(DNA).除此之外,机械力被用来对蛋白分子解聚,如超声破碎等.另外,添加PMSF等蛋白酶抑制剂,可保持蛋白完整性.由于商品化的IPG胶条是干燥脱水的,可在其水化的过程中加样,覆盖
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