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鹿森生物
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500ML
平衡盐溶液(Balanced Salt Solution,BSS)与细胞生长状态下的pH值、渗透压等环境状态一致,具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用,可满足体外实验中,细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。
Hanks平衡盐溶液是最常用的磷酸盐缓冲溶液之一,又称Hanks' Balanced Salt Solution、Hanks’BSS,或HBSS。本品主要由氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、碳酸氢钠、葡萄糖等组成,含钙离子和镁离子以及酚红,pH值为7.2~7.4。 本品经过滤除菌处理,内毒素含量低,可用于胰蛋白酶和EDTA细胞消化液等各种无或低钙镁细胞培养用液的配制,组织和细胞的漂洗等。
Hanks平衡盐溶液(1×,含酚红)(pH7.2-7.4)由于含有钙离子,易产生沉淀,出现该种情况后,一般置于温浴至沉淀溶解即可
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文献和实验动物细胞培养中Hanks液、D-Hanks液和消化液的配制方法
室一般用1:250(GRC公司生产)。胰蛋白酶对细胞的分离效果与细胞的类型、特性和瓶壁表面特性有关。一般来说浓度大、温度高(勿高于37℃)、作用时间长,则对细胞分离能力大。但超过一定程度会损伤细胞,导致细胞传代后不能贴壁或死亡。胰酶在pH 8.0、37℃时消化能力最强。溶液中的Ca2+、Mg2+和血清会降低胰酶活力,所以配制胰酶时须用无Ca2+、Mg2+的D-Hanks液。当消化结束时,可加入少量血清或含血清的培养基以终止胰酶作用。 细胞传代使用的胰酶浓度是0.25%或0.2%。用于原代细胞培养消化
的胰酶浓度是0.25%或0.2%。用于原代细胞培养消化组织块则为0.1%或0.125%。 三、仪器、试剂和材料 材料:3 000 mL锥形瓶,25 mL、50 mL试剂瓶,500 mL输液瓶,螺口盖,翻帽塞,pH试纸,孔径0.22μm的微孔滤膜。 试剂:NaCl,Na2HP04,KH2P04,KCl,酚红,NaHC03,胰蛋白酶干粉,0.02%EDTA,CaCl2,D-葡萄糖,MgCh·6H20,MgS04·7H20,酚红(0.1%)(配法:称酚红2 g,置于研磨
实验材料: 1. 多来自外科手术的临床病人或死亡时间不超过24h尸体的胸、腹部皮肤; 2. 不含Ca2+和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 培养用液:①RPMI1640完全培养液,由RPMI1640培养基添加10%人AB血清、2mol/L谷氨酰胺、50μg/ml庆大霉素和1μg/ml消炎痛;②D-Hanks平衡盐溶液:无Ca2+ 和Mg2+ ,添加庆大霉素50μg/ml;③消化液:为胰蛋白酶溶液,终浓度
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