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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
R23-1001
1000μl LTS 滤芯吸头,架装,无RNase、无DNase,灭菌,低吸附。96支/架,10架/盒,5盒/箱
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文献和实验Superscipt II―RT,混匀; 7. 42℃反应50分钟,然后70℃,15分钟灭活反转录酶. 二、 cDNA 第二链的合成 : 1. 第一链反应完成后,取2μl一链产物-20℃冰箱中保存,待电泳检测。其余的产物合并,混匀,然后顺序加入下列试剂(promega): 20μl 10×DNA Polymerase I buffer 6μl 10mM dNTP(自己配制) xμl dd H2O 1μl RNase H(2U/μl) 10μl DNA Polymerase
mmol/l Tris-HCl,pH7.4含50mmol/L MgCl2 ;100mmol/Lβ-巯基乙醇、1mg/ml BSA。 (2)缺口平移反应终止液:200mmol/L NaCl;10mmol/l Tris-HCl,pH7.4; 11mmol/L EDTA; 0.5% SDS。 (3)DNaseⅠ:干粉状DNaseⅠ(2000~3000u/mg)溶于20mmol/l Tris-HCl, pH7.5中(1mg/ml),10μl分装,-20℃保存一年。
液(5×),配方如下: 250mmol/L Tris?Cl pH8.3(37℃时); 375mmol/l KCl; 15mmol/L MgCl2; 50mmol/L DTT; 10mmol/L dATP, dCTP, dGTP, dTTP 混合物(各2.5mmol/L) 2×625μ rRNasinR RNA 酶抑制剂 10,000μ M-MLV 反转录酶, RNase H-5μg 对照RNA 400μl M-MLV 第二链缓冲液(10×),配方如下: 400
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