R21-0301巴罗克300μl LTS 吸头架装无酶无RN

cDNA文库组标准流程

10min。 15.  弃上清，取沉淀，空气中干燥RNA沉淀，直至无乙醇味。 16.  用40－60μl DEPC水溶解(300-500ug/g)RNA沉淀。 17.  取少量RNA用于测定OD值及电泳，其余置－80℃冰箱中保存。四、 TRIzol Reagent 提取total RNA(GIBCO) 1.查表2根据样品量选择适当的 TRIzol Reagent体积装入50ml RNase-free离心管中，注意样品体积不能超过TRIzol Reagent体积的10%。 2.将组织

分子生物学常用实验技术（page 3)

] dCTP 或[α-32 P]dATP:400 Ci/mmol, 10μCi/μl。 (4) E.coli DNA 聚合酶Ⅰ(4 单位/μ l):溶于50μ g/ml BSA, 1mmol/L DTT, 50%甘油，50mmol/L Tris?Cl(pH7.5)中。 (5)DNA 酶Ⅰ:1mg/ml。 EDTA :200mmol/L (pH8.0)。 (7)10mol/L NH4Ac。 操作步骤: (1) 按下列配比混合: 未标记的dNTP 10μl 10×切口

分子生物学常用实验技术（page 2)

覆盖在表面的矿物油。 3.再用酚:氯仿:异戊醇抽提二次,每次回收上层水相。 4.在水相中加300μl 95％乙醇,置-20℃下30min 沉淀。 5.在小离心机上10000rpm 离心10min,吸净上清液。加入1ml 70％乙醇,稍离后,吸净上清液.重复洗涤沉淀2 次。将沉淀溶于7ml ddH2O 中，待用。 （二）Wizard PCR DNA 纯化系统 Wizard PCR DNA 纯化系统可以快速、有效、可靠地提取PCR 扩增液中的DNA，提纯后的DNA可用于测序、标记