碳分解代谢物阻遏4样蛋白(CCRN4L)重组蛋白

Nat Commun：开发人工空间隔离策略，构建稳定的多物种微生物群落

稳定的微生物生态系统的重要因素。 受大自然的启发，研究团队开发了一种人工的空间分隔方法来构建由单一或多物种组成的合成微生物群落（图 1）。科研人员通过交联的凝胶网络构建尺寸为 ～400 微米的微球并包裹微生物 (Microbial swarmbot, MSB)。微球的三维网状交联结构允许小分子 (营养物质、信号分子和代谢物) 及生物大分子（蛋白质）的自由扩散，但会限制微球内的微生物的运动。因此，每个 MSB 代表一个可以与其他 MSB 交互的亚群。通过将包含不同亚群的 MSB 进行组合，科研

原核表达实验的高招

的lacIq突变菌株常被选为Lac/Tac/trc表达系统的表达菌株。现在的Lac/Tac/trc载体上通常还带有lacIq 基因，以表达更多lacI阻遏蛋白实现严谨的诱导调控。IPTG广泛用于诱导表达系统，但是IPTG有一定毒性，有人认为在制备医疗目的的重组蛋白并不合适，因而也有用乳糖代替IPTG作为诱导物的研究。另外一种研究方向是用lacI的温度敏感突变体，30度下抑制转录，42度开发。热诱导不用添加外来的诱导物，成本低，但是由于发酵过程中加热升温比较慢而影响诱导效果，而且热诱导本身会导致大肠

原核表达经验谈

+ 结构基因组成。其转录受CAP正调控和lacI负调控。lacUV5突变能够在没有CAP的存在下更有效地起始转录，该启动子在转录水平上只受lacI的调控，因而随后得到了更广泛采用。lacI产物是一种阻遏蛋白，能结合在操纵基因lacO 上从而阻遏转录起始。乳糖的类似物IPTG可以和lacI产物结合，使其构象改变离开lacO，从而激活转录。这种可诱导的转录调控成为了大肠杆菌表达系统载体构建的常用元件。tac启动子是trp启动子和lacUV5的拼接杂合启动子，且转录水平更高，比lacUV5更优越。trc启动