小鼠活化RNA聚合酶转录辅助因子(PC4)ELISA试剂盒

体外转录实用技巧

。） 使用不同的聚合酶 通常用于体外转录的三种 RNA 聚合酶可以相互不同地转录给定的模板。当转录不能完成时，可以充分利用这种转录给定模板序列的不同能力。改变转录模板前面的聚合酶启动子序列是一种劳动密集型修复，因为它可能需要设计 PCR 引物或亚克隆。Ambion 具有可简化过程的载体和引物。pTRIPLEscript 系列载体具有串联排列的 SP6、T7 和 T3 启动子，这些载体特别适用于亚克隆转录模板。或者，Ambion 的无克隆启动子添加试剂盒 Lig'nScribe 可用于改变可 PCR 扩增

这几类 PCR 技术你知道吗？

transcription，RT）与 PCR，可用于检测单个细胞或少数细胞中少于 10 个拷贝的 RNA 模板。 RNA 扩增包括两个步骤： 在单引物的介导下和逆转录酶的催化下，合成 RNA 的互补 cDNA；加热后 cDNA 与 RNA 链解离，然后与另一引物退火，并由 DNA 聚合酶催化引物延伸生成双链靶 DNA， 最后扩增靶 DNA。 cDNA 第二链的合成方法有以下几种: 1、自身引导法： 合成的单链 cDNA 3' 端能够形成一短的发夹结构，这就为第二链的合成提供了现成的引物，当第一链合成反应

盘点 PCR 的七大应用领域

RNA 并将mRNA逆转录成 cDNA。随后，通过由PCR扩增的cDNA数量，确定 mRNA 的初始水平。这一过程也被称为逆转录 PCR， RT-PCR （图 1）。 图 1. RT-PCR.RNA 被逆转录成 cDNA，随后通过 PCR 扩增 cDNA 终点 PCR 可通过凝胶里的扩增产物条带强度对 RNA 的表达进行定量（一种半定量方法）。例如，对起始 cDNA 进行连续稀释并扩增。通过凝胶电泳使不同起始量的终点 PCR 得率可视化（图 2），然后对条带强度进行定量，并以管家基因为参照