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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 供应商:
科邦兴业北京科技有限公司
- 检测范围:
0.156-10ng/mL
- 检测方法:
双抗体夹心法
- 灵敏度:
0.082ng/mL
- 规格:
48T/96T
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文献和实验」和「扩增区」分割开 PCR 体系配置和 PCR 扩增实验。如果不具备这样的条件,首先要避免荧光定量 PCR 实验结束之后开盖,以防扩增产物形成气溶胶对后续实验造成污染。少量意外开盖不能避免时,可以使用含有 UNG 酶(uracil-N-glycoslyase, 尿嘧啶 DNA 糖基化酶)的扩增预混液。如果在 PCR 反应中以 dUTP 代替 dTTP 参入到 PCR 产物中,形成了含有 dUTP 的扩增产物,UNG 酶能选择性断裂单链和双链 DNA 中 U 碱基的糖苷键, 降解 PCR 扩增
)法 由于UV照射的去污染作用对500bp以下的片段效果不好,而临床用于检测的PCR扩增片段通常为300bp左右,因此UNG的预防作用日益受到重视和肯定。 1、原理:在PCR产物或引物中用dU 代替dT。这种dU化的PCR产物与UNG一起孵育,因UDG可裂解尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架间的N-糖基键,可除去dU而阻止TaqDNA聚合酶的延伸,从而失去被再扩增的能力。UNG对不含dU的模板无任何影响。UNG可从单或双链DNA中消除尿嘧啶,而对RNA中的尿嘧啶和单一尿嘧啶分子则无任何作用
来防污染。Uracil-DNA N-glycosylase(UNG)尿嘧啶DNA糖基酶,来源于大肠杆菌重组克隆表达。 四、RNA定量 RNA也最好至少要用电泳,一方面定量,另一方面可以看看完整性。至于用分光光度计比较不同标本之间就更不准了。 RNA的贮藏,最主要的是温度,-20不够,最好-80,液氮最保险 mRNA是不能代替蛋白水平的分析的,因为还有翻译效率和RNA降解速度的影响。 五、RT-PCR有两种做法
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