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- 文献和实验
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99
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北京诺博莱德科技有限公司
产品品牌:Nobleryder
产品货号:NR223610
产品名称:七叶苷培养基
产品简介:
特性: 干粉培养基
灭菌情况: 未灭菌
储存条件: 常温,避光,干燥
培养基配方(每升)
Peptone(蛋白胨) 5.0g
Dipotassium phosphate磷酸氢二钾) 1.0g
Ferric citrate(枸橼酸铁) 0.5g
Escalin(七叶苷) 3.0g
pH7.3±0.1(25℃)
使用说明
称取本品9.5g于1L蒸馏水或去离子水中,加热溶解,分装,121℃高压灭菌15分钟,冷却,备用。
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文献和实验3`-T突出端的载体用于直接高效地连接PCR产物。系统中也包含感受态细胞和S.O.C培养基, 使得实验操作更为简单方便。所以TA克隆不需使用含限制酶序列的引物,不需将PCR产物进行优化,不需把PCR产物做平端处理(Invitrogen另有平端载体供高确限度酶克隆)。不需在PCR扩增产物上加接头,即可直接进行克隆。图32 The TA Cloning® ConceptTopo TA克隆方法(Topo TA Cloning Kit)Topo TA克隆原理与TA克隆一样,唯一不同的是TA克隆用的是T
。其所显示的染色体带纹清晰,普通显微镜下可以分辨,标本可长期保存,因此被广泛应用。实验步骤(以下以贴壁培养细胞为例)一、实验准备1)细胞完全培养基:根据细胞类型和实际需要确定2)细胞消化液:0.25% Trypsin-EDTA3)磷酸缓冲液(PBS):pH7.44)秋水仙素(或者秋水仙胺)溶液:20 μg/mL5)低渗液:0.075 M KCl 溶液6)固定液(新鲜配制):甲醇:冰醋酸 = 3:17)Giemsa 染色液:先配置 1% Giemsa 原液(以甘油,甲醇配制),再以 PBS 稀释 10 倍
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