AlphaLISA Nickel Chelate Accep

1. 无需洗涤步骤，无需分离步骤。
2. 易用性：添加步骤少，检测方法开发快速。
3. 亲和力范围广：可检测从皮摩尔到毫摩尔亲和力的强或弱相互作用。
4. 距离：可测量非常大的蛋白质或抗体复合物 —— 跨度可达 200 纳米或更大。
5. 高亲和力：每个微珠上的多个结合位点使得可以使用纳摩尔浓度的抗体或蛋白质，以及使用低亲和力结合剂。

AlphaScreen^® 和 AlphaLISA™是基于微珠的检测技术，用于以微孔板形式研究生物分子相互作用。首字母缩写 “Alpha” 代表放大的发光邻近均相检测。顾名思义，这些技术的一些关键特征是它们是无放射性、均相邻近检测。被捕获在微珠上的分子结合会导致能量从一个微珠转移到另一个微珠，最终产生发光 / 荧光信号。要理解信号是如何产生的，必须首先了解微珠。AlphaScreen 和 AlphaLISA 检测需要两种微珠类型：供体微珠和受体微珠。每种微珠类型包含不同的专有化学混合物，这是 AlphaScreen 技术的关键要素。供体微珠含有光敏剂酞菁，在 680 纳米光照下，它将周围的氧气转化为激发态和活性形式的 O2（单线态氧）。请注意，单线态氧不是自由基；它是具有单个激发电子的分子氧。像其他激发分子一样，单线态氧在回到基态之前具有有限的寿命。在其 4 微秒的半衰期内，单线态氧在溶液中可以扩散约 200 纳米。如果受体微珠在该邻近范围内，能量就会从单线态氧转移到受体微珠内的噻吨衍生物，随后在 520 - 620 纳米（AlphaScreen）或 615 纳米（AlphaLISA）处产生光。在没有受体微珠的情况下，单线态氧回到基态且不产生信号。这种依赖于邻近度的化学能量转移是 AlphaScreen 均相性质的基础。