- ￥14
- 禾午生物
- P50915
- 国产
- 2025年07月16日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
99
- 英文名：
pLV2-CMV-MCS-mCherry-Puro
- 保质期：
3个月~12个月
- 供应商：
上海禾午生物有限公司
- 保存条件：
负20℃&负80℃
- 规格：
干粉&甘油菌
| 名称 | pLV2-CMV-MCS-mCherry-Puro |
| 质粒宿主 | 哺乳细胞,慢病毒 |
| 质粒用途 | 蛋白表达 |
| 片段类型 | ORF |
| 原核抗性 | Amp |
| 筛选标记 | Puro |
| 荧光标记 | 红色 |
| 启动子 | CMV |
| 复制子 | pUC |
| 感受态 | Stbl3 |
| 温度 | 37度 |
| pLV3-U6-TMEM200A(human)-sgRNA3-Cas9-EGFP-Puro |
| pLV3-U6-GPX3(human)-sgRNA2-Cas9-EGFP-Puro |
| pCMV-ATP5PD(human)-3×FLAG-Neo |
| pCMV-TIPIN(human)-3×FLAG-Neo |
| pAAV-CamKII-Pdk2(mouse)-2×HA |
| pLV2-CMV-MCS-mCherry-Puro |
| pLV2-CMV-MCS-EYFP-Puro |
| pAAV-CamKII-Pdk1(mouse)-2×HA |
| pCMV-BGN(human)-3×FLAG-Neo |
| pCMV-EGFP-DCTN1(human)-3×HA-Neo |
| pCMV-BGN(human)-3×Myc-Neo |
| pCMV-UBE2O(human)-Neo |
| pLV3-CMV-ACADVL(human)-CopGFP-Puro |
| pLV3-CMV-LTF(human)-3×FLAG-Puro |
| pLV3-CMV-ACSL5(human)-3×FLAG-Puro |
| pAAV-CamKII-Pdpr(mouse)-2×HA |
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文献和实验：pCas9/gRNA1 载体本身不带筛选标签。我们用带有嘌呤霉素和 EGFP 标签的载体 pLV-EGFP（2A)puro 和 pCas9/gRNA1 载体共转染，再用嘌呤霉素筛选转染成功的细胞。 简要步骤 设计靶点→构建 pCas9/gRNA1 载体→pTYNE 验证靶点→pCas9/gRNA1 载体转染 293T 细胞→挑选培养细胞克隆→测序验证基因敲除 靶点设计和基因敲除载体构建 人 TP53 基因有多个 mRNA 和蛋白拷贝，2 个转录起始位点，以及多个
克隆 or 单克隆） --- 一、第一步：载体设计 载体元件由实验目的决定，逐项确认： 元件 选择要点 启动子 普遍高表达选 CMV、EF1α 等；需要模拟内源水平或避免沉默可考虑其他启动子 目的基因 CDS 序列；是否需要做 WB 决定是否加 Flag/HA 等融合标签 荧光标签 是否需要观察感染效率或做活细胞示踪（GFP/mCherry 等） 抗性基因 常用 puromycin（Puro），也可选新霉素（Neomycin）、杀稻瘟菌素（Blasticidin） 其他元件
基因功能研究实验设计流程怎么走？从目的基因到验证的全链路拆解
是神经特异的，动物脑实验常用。标签和报告基因（EGFP/mCherry/Luciferase）按检测手段配，做免疫荧光就别让载体荧光和你的染色通道撞车。对照一定要齐：过表达对照 MCS 处不插片段，干扰/敲除对照插一段无义靶点，正式实验没对照等于没做。 步骤 4-5：包病毒和感染/注射 策略定完，细胞实验要长期稳定表达就包慢病毒；只想快速看个表型用腺病毒；动物体内直接上 AAV。超过 4kb 的大基因用 GV747 大基因载体，T/NK 这类悬浮难转染细胞用悬浮细胞专用慢病毒。感染细胞前，先用带荧
