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- 上海莼试
- CS-01Y67175
- 国产
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
43
- 英文名：
A-196
- CAS号：
1982372-88-2
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
10mM*1mLinDMSO1mg 5mg 10mg 50mg 100mg
| 产品名称 | A-196 | 产品货号 | CS-01Y67175 |
| 规格 | 10mM*1mLinDMSO1mg 5mg 10mg 50mg 100mg | CAS号 | 1982372-88-2 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C18H16Cl2N4 |
| 分子量 | 359.25 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
A-196规格：10mM*1mLinDMSO1mg 5mg 10mg 50mg 100mg
CAS：1982372-88-2
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C18H16Cl2N4
分子量：359.25
溶解度：DMSO : ≥ 31 mg/mL (86.29 mM)
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
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产品描述:
A-196 is a potent and selective chemical inhibitor of SUV420H1 and SUV420H2 that inhibits the di- and trimethylation of H4K20me in multiple cell lines. Target: A-196 is a selective chemical probe for SUV420H1/H2. A-196 is the first potent and selective chemical probe for SUV420H1 and SUV420H2. The in vitro activity of A-196 includes inhibition of SUV420H1 with IC50 = 25 nM and SUV420H2 with IC50 = 144 nM for methylation of H4K20me and greater than 100-fold selectivity over other histone methyltransferases and non-epigenetic targets. In cell assays, A-196 inhibits the di- and tri-methylation of H4K20me in multiple cell lines with IC50 < 1 μM. SUV420H1 and SUV420H2 are two highly homologous methyltransferases that di- and tri-methylate 'Lys-20' of histone H4.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| 泛素特异性蛋白酶9X封闭多肽 | 核纤层蛋白相关蛋白1B封闭多肽 |
| 同源盒蛋白B7封闭多肽 | 视锥感光细胞环磷酸鸟苷门控通道蛋白CNG3抗体 |
| 前列腺细胞凋亡反应蛋白4封闭多肽 | 胱抑素C/半胱氨酸蛋白酶抑制剂C抗体 |
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| RSPH6A蛋白封闭多肽 | β淀粉样前体蛋白结合蛋白1抗体（X11α） |
| 神经肽NPSF封闭多肽 | 共济失调蛋白7样1抗体 |
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| 干细胞生长因子SCGF封闭多肽 | 磷酸化热休克因子1抗体 |
| 神经细胞分化相关蛋白AHNAK封闭多肽 | 胆碱转运体样蛋白4 |
| 磷酸化P63肿瘤抑制基因封闭多肽 | 多腺苷二磷酸多聚酶PARP11抗体 |
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| 凋亡诱导蛋白D封闭多肽 | A-196神经营养因子1/B淋巴细胞刺激因子3抗体 |
| 神经突触前膜胞内蛋白13封闭多肽 | 热休克蛋白J1抗体 |
| 配对盒基因3抗体 | ATP依赖解螺旋酶ETL1抗体 |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验microRNA sensors: microRNAs表达位点
(see above, b), no blue stain will occur if that specific microRNA is present in the same tissue (see below) read the paper by Mansfield et al. .The staining pattern in the mouse embryos above is Hox-like because the miR-10 and miR-196 Hox genes
白尾鹿（Odocoileus leucurus；white－tail－deer）
鹿科空齿鹿属的 1种。因奔跑时尾翘起，尾底显露白色而得名。体长 1.83～ 1.98米，肩高 0.92米，尾长约 10～ 28厘米；耳小；角的背枝简单；蹠腺小，长仅约 3厘米，腺周围有白毛。分布于加拿大南部、美国大部和南美洲北部。每年 11～ 12月交配，一雄多雌，妊娠期 196～ 210天，每窝产仔 1～ 2只（多时 3～ 4只）。幼鹿随母鹿生活 1～ 2年， 8个月性成熟。善游泳，能游过 6～ 14千米的水域。有季节性迁徙习性。不喜结群。当大雪或食物缺乏时，在适宜栖息
ESCO超净工作台和生物安全柜，为您提供更加安全的防护。 四、液氮罐 为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃，因此，需要液氮罐。在此环境中，一般细胞可以保存十年具有活性。五、超低温冰箱 细胞的冻存过程需要一系列程序降温，一般4℃下存放30 min，转放-20℃ 1 hour，再转入-70至-80℃过夜，之后才可以转移到液氮内(-196℃)，这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月，对于不需要长期冻存的细胞
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