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- 文献和实验
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10
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12个月
- 供应商:
苏州为度生物技术有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100T/盒
小鼠肿瘤坏死因子-α(mTNF-α)检测试剂盒(均相发光法)
预期用途:
TNF可由生物体内的多种细胞产生,包括活化的巨噬细胞、NK细胞和T淋巴细胞。其中,主要由巨噬细胞产生的TNF被命名为TNF-α,具有细胞增殖、代谢激活、炎症反应和细胞死亡等多种生物学功能。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是一种连接炎症和免疫系统的关键细胞因子,mTNF-α前体为235氨基酸残基,信号肽79氨基酸残基,成熟的mTNF-α分子量为17kDa,由156个氨基酸残基组成,第69位和100位两个半胱氨酸形成分子内二硫键。
本产品采用均相发光法定量检测缓冲液、细胞培养上清或血清中小鼠TNF-α的浓度。
产品优势:
- 均相免清洗反应模式,便捷高效,匹配自动化仪器
- 动态范围宽,样本用量小,可实现高通量快速检测
- 更高的灵敏度和抗干扰能力,稳定性好,重复性佳
- 样本兼容性高,适用于细胞上清、血清等天然样本
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心的均相发光法进行mTNF-α浓度的检测。均相化学发光是基于供受体微球近距离传递能量发光的均相免疫分析方法。
它采用受体微球交联mTNF-α抗体1,供体微球交联链霉亲和素,生物素标记mTNF-α抗体2。标记抗体、受体微球与待测物混合孵育,形成双抗体夹心免疫复合物,再与供体微球交联形成发光复合物。当两种微球的间距小于200nm, 经激发光照射后,供体微球产生单线态氧并扩散至受体微球,受体微球接受能量产生发射光。通过感光元件收集光信号,采用数学拟合计算待测物中mTNF-α的浓度。当待测物中不含mTNF-α时,无免疫复合物的形成,两种微球的间距大于200nm, 超出单线态氧的传递距离, 则受体微球不产生发射光。
本品操作过程简便,无需清洗分离;反应过程为均相反应,37℃孵育条件下,仅需25分钟即可获得检测结果,速度快、灵敏度高。

完整标准曲线实例:
动态范围:0~30000 pg/mL

线性范围:2.50~3000 pg/mL

其他性能详见说明书
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文献和实验小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α) 酶联免疫 分析( ELISA ) 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,细胞上清及相关液体样本中 肿瘤坏死因子α(TNF-α) 含量。 实验原理 : 本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 中 小鼠 肿瘤坏死因子α(TNF- α) 水平。用纯化的 小鼠 肿瘤坏死因子α(TNF- α) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 肿瘤坏死因子α
内或体外培养而分泌的抗体单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb或Mab)。单克隆抗体仅针对一种抗原决定簇,具有很高的特异性。单克隆抗体通常用抗原免疫小鼠制备。将免疫的脾细胞(含产生抗体的B细胞)与小鼠肿瘤细胞融合,分离杂交瘤细胞,接种于小鼠腹腔,产生的腹水中含有浓度很高的单克隆抗体。(三)抗原抗体反应 1、可逆性 抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为:Ag+Ab→Ag•Ab.。抗体的亲和力(affinity)是抗原抗体间的固有结合力,可以平衡常数K
- α) 再与HRP 标记的 TNF-α 抗体结合,形成抗体- 抗原 - 酶标抗体复合物 ,经过彻底洗涤后 加 底物TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 小鼠 肿瘤坏死因子α(TNF- α) 呈正相关。用酶标仪在 450 nm波长下测定吸光度( OD 值), 通过标准曲线 计算样品 中猴 肿瘤坏死因子α(TNF- α) 浓度。 试剂盒组成 : 试剂盒组成
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