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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
52
- 英文名:
Capecitabine
- CAS号:
154361-50-9
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
10mM (in 1mL DMSO) 50mg
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断!
产品描述:

In vitro: In antiproliferative assays, both LS174T WT and LS174T-c2 cells were more sensitive to capecitabine when cultivated in the same plates as HepG2 hepatoma. In LS174T WT alone and cultivated with HepG2, IC50values of capecitabine were 890 ± 48 and 630 ± 14 μm respectively. The IC50fell from 330 ± 4 down to 89 ± 6 μmin LS174T-C2 subline when cultivated in the same plates as hepatoma cells.In the LS174T-c2 subclone, whereas little cell death occurred in cells exposed to capecitabine, both early and late apoptosis were increased by 244 and 262%, respectively [1]. Furthermore, Capecitabine induces apoptosis in a Fas-dependent manner, and shows a 7-fold higher cytotoxicity and markedly stronger apoptotic potential in thymidine phosphorylase (TP)-transfected LS174T-c2 cells [2].In vivo:Capecitabine was effective in a wider dose range in CXF280, HCT116, COLO205, and WiDr human colon cancer xenograft models [2]. In highly metastatic nude mice model, capecitabine inhibited tumor growth and metastatic recurrence after resection of HCC attributed to the high expression of PD-ECGF in tumors [3].References:[1]. Ishikawa T, Utoh M, Sawada N, et al. Tumor selective delivery of 5-fluorouracil by capecitabine, a new oral fluoropyrimidine carbamate, in human cancer xenografts[J]. Biochemical pharmacology, 1998, 55(7): 1091-1097.[2]. Ishikawa T, Utoh M, Sawada N, et al. Tumor selective delivery of 5-fluorouracil by capecitabine, a new oral fluoropyrimidine carbamate, in human cancer xenografts[J]. Biochemical pharmacology, 1998, 55(7): 1091-1097.[3]. Zhou J, Tang Z Y, Fan J, et al. Capecitabine inhibits postoperative recurrence and metastasis after liver cancer resection in nude mice with relation to the expression of platelet-derived endothelial cell growth factor[J]. Clinical cancer research, 2003, 9(16): 6030-6037.
化学性质:

规格:10mM (in 1mL DMSO) 50mg
CAS:154361-50-9
别名:
化学名:pentyl N-[1-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-methyloxolan-2-yl]-5-fluoro-2-oxopyrimidin-4-yl]carbamate
分子式:C15H22FN3O6

分子量:359.35
溶解度:≥ 17.95mg/mL in DMSO
储存条件:Store at-20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:

1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:

(1)Capecitabine实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:

| 产品名称 | Capecitabine | 产品货号 | CS-01Y65406 |
| 规格 | 10mM (in 1mL DMSO) 50mg | CAS号 | 154361-50-9 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C15H22FN3O6 |
| 分子量 | 359.35 | 用途 | 仅供科研研究使用 |

In vitro: In antiproliferative assays, both LS174T WT and LS174T-c2 cells were more sensitive to capecitabine when cultivated in the same plates as HepG2 hepatoma. In LS174T WT alone and cultivated with HepG2, IC50values of capecitabine were 890 ± 48 and 630 ± 14 μm respectively. The IC50fell from 330 ± 4 down to 89 ± 6 μmin LS174T-C2 subline when cultivated in the same plates as hepatoma cells.In the LS174T-c2 subclone, whereas little cell death occurred in cells exposed to capecitabine, both early and late apoptosis were increased by 244 and 262%, respectively [1]. Furthermore, Capecitabine induces apoptosis in a Fas-dependent manner, and shows a 7-fold higher cytotoxicity and markedly stronger apoptotic potential in thymidine phosphorylase (TP)-transfected LS174T-c2 cells [2].In vivo:Capecitabine was effective in a wider dose range in CXF280, HCT116, COLO205, and WiDr human colon cancer xenograft models [2]. In highly metastatic nude mice model, capecitabine inhibited tumor growth and metastatic recurrence after resection of HCC attributed to the high expression of PD-ECGF in tumors [3].References:[1]. Ishikawa T, Utoh M, Sawada N, et al. Tumor selective delivery of 5-fluorouracil by capecitabine, a new oral fluoropyrimidine carbamate, in human cancer xenografts[J]. Biochemical pharmacology, 1998, 55(7): 1091-1097.[2]. Ishikawa T, Utoh M, Sawada N, et al. Tumor selective delivery of 5-fluorouracil by capecitabine, a new oral fluoropyrimidine carbamate, in human cancer xenografts[J]. Biochemical pharmacology, 1998, 55(7): 1091-1097.[3]. Zhou J, Tang Z Y, Fan J, et al. Capecitabine inhibits postoperative recurrence and metastasis after liver cancer resection in nude mice with relation to the expression of platelet-derived endothelial cell growth factor[J]. Clinical cancer research, 2003, 9(16): 6030-6037.
化学性质:

规格:10mM (in 1mL DMSO) 50mg
CAS:154361-50-9
别名:
化学名:pentyl N-[1-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-methyloxolan-2-yl]-5-fluoro-2-oxopyrimidin-4-yl]carbamate
分子式:C15H22FN3O6

分子量:359.35
溶解度:≥ 17.95mg/mL in DMSO
储存条件:Store at-20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:

1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:

(1)Capecitabine实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:

| Recombnant Human CD278/CO, N-H | PE-Cy3标记链霉亲和素 |
| 磷酸化淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶封闭多肽 | NCMAP Antibody Blocking Peptide |
| DYDC2蛋白封闭多肽 | RABAC1 Antibody Blocking Peptide |
| Ras样蛋白A封闭多肽 | SRRM2 Antibody Blocking Peptide |
| 三磷酸腺苷依赖解旋酶DDX3封闭多肽 | HDAC9 Antibody Blocking Peptide |
| 磷酸化髓样细胞白血病-1封闭多肽 | phospho-MyoD1(Ser200) Antibody Blocking Peptide |
| SAFB蛋白封闭多肽 | FBXO15 Antibody Blocking Peptide |
| 锌指蛋白823封闭多肽 | 补体C1qTNF9链多肽封闭多肽 |
| 1号染色体开放阅读框130封闭多肽 | HSZFP36/ZNF823 Antibody Blocking Peptide |
| PRA1蛋白封闭多肽 | SAFB Antibody Blocking Peptide |
| 组蛋白去乙酰化酶9封闭多肽 | Phospho-MCL1 (Ser159/Thr163) Antibody Blocking Peptide |
| 丝氨酸/精氨酸相关核基质蛋白2封闭多肽 | DDX3X Antibody Blocking Peptide |
| 磷酸化肌原调节蛋白封闭多肽 | CapecitabineRALA Antibody Blocking Peptide |
| Fbx15蛋白封闭多肽 | DYDC2 Antibody Blocking Peptide |
| Streptavidin / PE-Cy3 | phospho-LCK (Tyr394) Antibody Blocking Peptide |
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Capecitabine
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