- ￥7010
- 澳培赛生物
- 上海
- ORCH362
- 2025年12月24日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 供应商：
澳睿赛生物技术（上海）有限公司
- 肿瘤类型：
详见说明书或咨询客服
- 细胞类型：
详见说明书或咨询客服
- 品系：
原代细胞
- 组织来源：
手术切除的皮肤组织
- 相关疾病：
详见说明书或咨询客服
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
详见说明书或咨询客服
- 细胞形态：
梭形细胞
- 是否是肿瘤细胞：
详见说明书或咨询客服
- 器官来源：
详见说明书或咨询客服
- 运输方式：
常温
- 年限：
不限
- 生长状态：
详见说明书或咨询客服
- 规格：
5×10⁵Cells/T25培养瓶
| 一、细胞基本属性 | |
| 细胞名称 | 人黑色素瘤细胞 |
| 组织来源 | 手术切除的皮肤组织 |
| 商品货号 | ORCH362 |
| 种属来源 | 人 |
| 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
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细胞简介
|
黑色素瘤是黑色素细胞来源的肿瘤， 常见于皮肤， 粘膜、眼脉络膜等次之， 恶性 程度极高， 是皮肤肿瘤中恶性程度最高的瘤种，容易出现转移。
黑色素瘤细胞核较正常细胞大， 细胞核异形性明显，常染色体丰富。
|
| 培养基 | 原代肿瘤细胞培养体系 |
| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 生长特性 | 贴壁培养 |
| 细胞形态 | 梭形细胞 |
| 传代特性 | 细胞特性确定传代 |
| 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养条件 | 气相： 空气，95%；CO2 ，5% |
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
在澳睿赛技术部标准操作流程下，建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 悬浮细胞处理
1)收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中，用PBS清洗细胞培养瓶1-2次，收集清洗液；
2)1200-1500rpm离心3min，弃上清，收集细胞沉淀；
3)加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞；将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中，置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)若遇到悬浮细胞团块较大，无法机械吹散时，向步骤2)中细胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至离心管中，用吸-管轻轻吹打混匀，37°C温浴2-3min，消化结束后，加入胰酶抑制剂(或血清)终止消化，用吸管轻轻吹打，分散细胞；1200rpm离心5min，弃上清，收集细胞沉淀；
5)加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀；按传代比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
6)待细胞状态稳定后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
4. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和澳睿赛技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
2)本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验黑色素瘤（melanmoa）又称为恶性黑色素瘤，是一种能产生黑色素的高度恶性肿瘤，大多见于30岁以上成人，发生于皮肤者以足底部和外阴及肛门周围多见，可以一开始即为恶性，但通常由交界痣恶变而来。凡黑痣色素加深、体积增大、生长加快或溃破、发炎和出血等常是恶变的象征。此瘤也可发生于粘膜和内脏器官。黑色素瘤的组织结构呈多样性，瘤细胞可呈巢状、条索状或腺泡样排列。瘤细胞可呈多边形或梭形，核大，常有粗大的嗜酸性核仁，胞浆内可有黑色素颗粒。也有胞浆内没有黑色素颗粒的黑色素瘤，称为无黑色素性黑色素瘤
呈黑色或黑褐色的高度恶性的肿瘤。多从皮肤、眼球、脑脊髓膜等生理上有黑色素（ melanin）存在的组织发生。生长甚快，易转移到淋巴结、肝脏等处，且易再发。不仅见于老年，青年也有大致相同的发病率。主张起源于中胚叶的学者使用黑色肉瘤（德 Melanosarkom）这一名称；此外，如果呈现上皮性排列时则称为黑色素癌（德 Melanokarzinom）。在肿瘤组织内氧化的酪氨酸以二羟基吲哚（ dihydroxyindole）和多巴（ dopa）从尿中排出，形成黑色素，而表现为黑色
在临床上黑色素瘤（melanoma）恶性程度极高。黑色素瘤多数是在色素病变的基础上发生，少数发生于正常皮肤或粘膜的色素细胞。具体原因不明，多数认为与内分泌因素有关。在外伤刺激，日光照射有促发成黑色素瘤的作用。 1．病理为痣细胞或色素细胞的恶性增殖。瘤细胞为圆形、椭圆形及梭形。核仁较大，胞核常见有丝分裂。多形不规则的瘤细胞散在或成组排列成巢状或与表皮相连，呈条索状伸入真皮。黑色素瘤细胞可侵入表皮引起表皮面崩溃。细胞浆内所含黑色素多寡不一，而有的无色素，临床称为
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