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小鼠II型肺泡上皮细胞

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  • ¥4570
  • 澳培赛生物
  • 上海
  • ORCM321
  • 2026年04月03日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 库存

      999

    • 供应商

      澳睿赛生物技术(上海)有限公司

    • 肿瘤类型

      详见说明书或咨询客服

    • 细胞类型

      详见说明书或咨询客服

    • 品系

      原代细胞

    • 组织来源

      正常肺组织

    • 相关疾病

      详见说明书或咨询客服

    • 物种来源

      小鼠

    • 免疫类型

      详见说明书或咨询客服

    • 细胞形态

      上皮细胞样

    • 是否是肿瘤细胞

      详见说明书或咨询客服

    • 器官来源

      详见说明书或咨询客服

    • 运输方式

      常温

    • 年限

      不限

    • 生长状态

      详见说明书或咨询客服

    • 规格

      5×10⁵Cells/T25培养瓶

    小鼠II型肺泡上皮细胞
    一、细胞基本属性
    细胞名称
    小鼠II型肺泡上皮细胞
    组织来源
    正常肺组织
    商品货号
    ORCM321
    种属来源
    小鼠
    产品规格
    5×105cells/T25细胞培养瓶
    细胞简介
    小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞分离自肺组织;肺泡由单层上皮细胞构成的半球状囊泡。肺中的支气管经多次反复分枝成无数细支气管,它们的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即为肺泡。小肺泡细胞,又称I型肺泡细胞,厚约0.1微米,基底部是基底膜,无增殖能力。大肺泡细胞,又称Ⅱ型肺泡细胞,分泌表面活性物质(二棕榈酰卵磷脂),以降低肺泡表面张力。Ⅱ型肺泡细胞位于Ⅰ型肺泡细胞之间,数量较Ⅰ型肺泡细胞多,但覆盖面积比Ⅰ型肺泡细胞小。细胞立方形或圆形,顶端突入肺泡腔。细胞核圆形,胞质着色浅、呈泡沫状。电镜下,细胞游离而有少量微绒毛,胞质内富含线粒体和溶酶体,有较发达的粗面内质网和高尔基复合体。核上方有较多的分泌颗粒,电子密度高、大小不等,直径约0.1-1.0μm颗粒内含有平行排列的板层状结构,称为嗜饿性板层小体。小体内的主要成分为磷脂,以二棕榈酰卵磷脂为主,此外还有糖胺多糖及蛋白质等。颗粒内物质释放出来后,在肺泡表面形成一层粘液层,称为表面活性物质(surfactant)。表面活性物质有降低肺泡表面张力、稳定肺泡大小的作用。呼气时肺泡缩小,表面活性物质密度增加,表面张力降低,防止肺泡过度塌陷;吸气时肺泡扩张,表面活性物质密度减小,肺泡回缩力加大,可防止肺泡过度膨胀。表面活性物质的缺乏或变性均可引起肺不张,过度通气可造成表面活性物质缺乏;吸入毒气可直接破坏表面活性物质。Ⅱ型肺泡细胞有分裂、增殖并分化为Ⅰ型肺泡细胞的潜能,故具有修复受损伤上皮的作用。
    培养基
    原代上皮细胞培养体系
    换液频率
    每2-3天换液一次
    生长特性
    贴壁
    细胞形态
    上皮细胞样
    传代特性
    根据细胞特性
    消化液
    0.25%胰蛋白酶
    培养条件
    气相:空气,95%;CO2,5%
    质量检测:澳睿赛实验室分离的小鼠II型肺泡上皮细胞经SP-C免疫荧光鉴定为阳性,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 
    小鼠II型肺泡上皮细胞体外培养周期有限;建议使用澳睿赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。 
    二、细胞培养状态
    发货时发送细胞电子版照片 
    三、使用方法
    在澳睿赛技术部标准操作流程下,建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
    客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
    1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
    2. 贴壁细胞消化
    1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
    3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
    3. 悬浮细胞处理
    1)收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中,用PBS清洗细胞培养瓶1-2次,收集清洗液;
    2)1200-1500rpm离心3min,弃上清,收集细胞沉淀;
    3)加入5ml新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞;将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中,置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
    4)若遇到悬浮细胞团块较大,无法机械吹散时,向步骤2)中细胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至离心管中,用吸-管轻轻吹打混匀,37°C温浴2-3min,消化结束后,加入胰酶抑制剂(或血清)终止消化,用吸管轻轻吹打,分散细胞;1200rpm离心5min,弃上清,收集细胞沉淀;
    5)加入5ml新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀;按传代比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
    6)待细胞状态稳定后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。  
     
    4. 细胞收货脱落
    1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
    3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
    5. 细胞实验
    因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。       
    四、注意事项
    1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
    2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
    3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和澳睿赛技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
    5. 该细胞只可用于科研。
    1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
    2)本产品未通过用于活体诊断的审核 
    备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考

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