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大鼠精原干细胞

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  • ¥5954
  • 澳培赛生物
  • 上海
  • ORCR171
  • 2025年12月17日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 库存

      999

    • 供应商

      澳睿赛生物技术(上海)有限公司

    • 肿瘤类型

      详见说明书或咨询客服

    • 细胞类型

      详见说明书或咨询客服

    • 品系

      原代细胞

    • 组织来源

      睾丸组织

    • 相关疾病

      详见说明书或咨询客服

    • 物种来源

      大鼠

    • 免疫类型

      详见说明书或咨询客服

    • 细胞形态

      球形

    • 是否是肿瘤细胞

      详见说明书或咨询客服

    • 器官来源

      详见说明书或咨询客服

    • 运输方式

      常温

    • 年限

      不限

    • 生长状态

      详见说明书或咨询客服

    • 规格

      5×10⁵Cells/T25培养瓶

    大鼠精原干细胞
    Rat spermatogonial stem cells
    一、细胞基本属性
    细胞名称
    大鼠精原干细胞
    组织来源
    睾丸组织
    商品货号
    ORCR171
    种属来源
    大鼠
    产品规格
    5×105cells/T25细胞培养瓶
    细胞简介
    大鼠精原干细胞分离自睾丸组织;精原干细胞是位于睾丸生精小管的生精上皮内的一群生精干细胞,是成体内的定向干细胞。精原干细胞的一些独特优势使其成为动物转基因的理想宿主细胞。精原干细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多项生命活动的调节机制的深入研究,精子发生机理的进一步阐明以及精原干细胞转染,异体、异种移植技术的实际应用,都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化,以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞用于体外培养。在哺乳动睾丸内,精子发生时一个受高度调控和持续的过程,精原干细胞(SSCs)一方面进行自我更新维持干细胞数量,另一方面又不断执行分化成各级生精细胞直至最后生成精子。精原干细胞定居在曲精细管上皮的基膜处,是哺乳动物精子发生的最原始细胞,也是动物体内一起能将遗传信息传递的干细胞。精原干细胞体外培养体系的建立,在生物学、医学、畜牧业生产及制备转基因动物等领域具有广阔的应用前景。精原干细胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群细胞,具有自我更新能力和多向分化潜能,是哺乳动物体内唯一能将遗传信息传递给下一代的成体干细胞。
    培养基
    含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
    换液频率
    每2-3天换液一次
    生长特性
    悬浮
    细胞形态
    球形
    传代特性
    可传3代左右
    传代比例
    1:2
    消化液
    0.25%胰蛋白酶
    培养条件
    气相:空气,95%;CO2,5%
     
    方法简介:澳睿赛实验室分离的大鼠精原干细胞采用先机械吹打、后胰蛋白酶消化,结合Percoll密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
    质量检测:澳睿赛实验室分离的大鼠精原干细胞经CD44免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
    大鼠精原干细胞体外培养周期有限;建议使用澳睿赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
     
    二、细胞培养状态
    发货时发送细胞电子版照片
    三、使用方法
    大鼠精原干细胞是一种悬浮细胞,细胞形态呈球形,在澳睿赛技术部标准操作流程下 ,细胞可传3代左右;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
    客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
    1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
    2. 贴壁细胞消化
    1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
    3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          
    3. 细胞收货脱落
    1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
    3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
    4. 细胞实验
    因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
    四、注意事项
    1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
    2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
    3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和澳睿赛技
    术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
    5. 该细胞只可用于科研。
    1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
    2)本产品未通过用于活体诊断的审核 
    备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考

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