10×细胞/病毒裂解试剂盒（10×Lysis buffer）

产品描述

李记生物的10×裂解液（10×Lysis Buffer）是一种比较强烈的细胞/病毒裂解液，主要成分为Tris-HCl、SDS以及Tween-20、EDTA等。裂解液裂解得到的核酸样品可以用于常规的PCR、qPCR、ddPCR等。

本产品可以用于细胞/病毒样品。

订购信息

产品名称	货号	规格
10×细胞/病毒裂解试剂盒（10×Lysis buffer）	AN19L050	1mL
10×细胞/病毒裂解试剂盒（10×Lysis buffer）	AN19L051	2*1mL

产品组分

组分	AN19L050	AN19L051	储存条件
A.  10×裂解液	1 mL	2*1 mL	-20℃
B.  Proteinase K	20 mg/mL	20 mg/mL	4℃或室温

运输与保存

蓝冰运输。组分A在-20℃保存，组分B在4℃或室温保存，有效期12个月。

使用方法

1.  从冰箱中取出10×裂解液，置于室温条件下溶解，涡旋混匀后待用。

2.  10×裂解混合液配制：裂解试剂的单位使用量见下表，可按实际用量的1.1倍配制混合液，根据实际样本量（N），取相应体积的10×裂解液和Proteinase K（Proteinase K在使用前加入），涡旋振荡混匀后使用。Proteinase K用量可根据实验需要适当调整。

	单位用量	实际用量（1.1×N）
10× Lysis Buffer（10*）	1.8	1.98N
Proteinase K	0.2	0.22N

3.  操作步骤

3.1  病毒样本

取病毒溶液18μl和10×裂解液（含Proteinase K）混合液2μl，建议裂解条件如下，实际裂解条件可根据裂解体积作相应调整。

	温度	时间
消化	68℃	15min
灭活	98℃	3min

3.2  细胞样本

3.2.1   1×裂解液（含Proteinase K）配制

实验前根据实际需要，使用PDB（和元生物货号：RP004）或PBS，将步骤2配制好的10×裂解混合液，稀释至1×裂解混合液。

3.2.2   样本前处理

①贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍，胰酶消化后离心收集细胞。

②悬浮细胞：400g离心5min收集细胞，轻轻涡旋振荡或者弹击管底以把细胞尽量分散开。

3.2.3   样本裂解

按照＜1E7细胞量每孔加入100 μl的1×裂解液，涡旋振荡15s充分裂解细胞，充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成＜1E7细胞/管，然后再进行裂解。建议裂解条件如下，实际裂解条件可根据裂解体积作适当调整。

	温度	时间
消化	55℃	60min
灭活	95℃	15min

4.  样品充分裂解后稀释10倍，可直接用于下游的PCR扩增。

注意事项

1.  本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。

2.  为取得最佳的使用效果，尽量避免反复冻融，建议分装后使用。

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本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。