- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y68984
- 国产
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
44
- 英文名：
Obestatin (human) (trifluoroacetate salt)
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
-20°C
- 规格：
500μg
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
化学性质:
Obestatin (human) (trifluoroacetate salt)规格：500μg
CAS：N/A
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C116H176N32O33?XCF3COOH
分子量：2546.8
溶解度：Water: 1 mg/ml
储存条件：-20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Obestatin is a 23 amino acid peptide hormone with a conserved C-terminal glycine residue and amidation site that is formed by cleavage of the ghrelin and obestatin prepropeptide.1 It binds to the orphan receptor GPR39 (Kd = 1 nM) and stimulates cAMP production in CHO and HEK293 cells overexpressing human GPR39. Obestatin inhibits contraction of isolated mouse jejunum muscle strips induced by ghrelin . In vivo, obestatin (12.5-1,000 nmol/kg) suppresses food intake in a time- and dose-dependent manner and reduces body weight gain and gastric emptying in mice. Obestatin (0.22 g per animal) also reduces food intake and glucose response without affecting plasma insulin responses in fasted high-fat diet fed mice.21.Zhang, J.V., Ren, P.C., Avsian-Kretchmer, O., et al.Obestatin, a peptide encoded by the ghrelin gene, opposes ghrelin's effects on food intakeScience310(5750)996-999(2005) 2.Subasinghage, A.P., Green, B.D., Flatt, P.R., et al.Metabolic and structural properties of human obestatin {1-23} and two fragment peptidesPeptides31(9)1697-1705(2010
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
| 产品名称 | Obestatin (human) (trifluoroacetate salt) | 产品货号 | CS-01Y68984 |
| 规格 | 500μg | CAS号 | N/A |
| 含量 | >95.00% | 分子式 | C116H176N32O33?XCF3COOH |
| 分子量 | 2546.8 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Obestatin (human) (trifluoroacetate salt)规格：500μg
CAS：N/A
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C116H176N32O33?XCF3COOH
分子量：2546.8
溶解度：Water: 1 mg/ml
储存条件：-20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Obestatin is a 23 amino acid peptide hormone with a conserved C-terminal glycine residue and amidation site that is formed by cleavage of the ghrelin and obestatin prepropeptide.1 It binds to the orphan receptor GPR39 (Kd = 1 nM) and stimulates cAMP production in CHO and HEK293 cells overexpressing human GPR39. Obestatin inhibits contraction of isolated mouse jejunum muscle strips induced by ghrelin . In vivo, obestatin (12.5-1,000 nmol/kg) suppresses food intake in a time- and dose-dependent manner and reduces body weight gain and gastric emptying in mice. Obestatin (0.22 g per animal) also reduces food intake and glucose response without affecting plasma insulin responses in fasted high-fat diet fed mice.21.Zhang, J.V., Ren, P.C., Avsian-Kretchmer, O., et al.Obestatin, a peptide encoded by the ghrelin gene, opposes ghrelin's effects on food intakeScience310(5750)996-999(2005) 2.Subasinghage, A.P., Green, B.D., Flatt, P.R., et al.Metabolic and structural properties of human obestatin {1-23} and two fragment peptidesPeptides31(9)1697-1705(2010
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| Recombnant Human PCM1, N-GT | RNF141 Antbody Blockng Peptde |
| HELL Antbody Blockng Peptde | 骨成型蛋白受体1A封闭多肽 |
| GALE/Galactowaldenae Antbody Blockng Peptde | 丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶4封闭多肽 |
| KF4A Antbody Blockng Peptde | 唾液酸乙酰酯酶封闭多肽 |
| PFN1 Antbody Blockng Peptde | 心血管调节肽alun-α封闭多肽 |
| FAM209B Antbody Blockng Peptde | 自噬相关蛋白14封闭多肽 |
| CHRNA1 Antbody Blockng Peptde | MH4蛋白封闭多肽 |
| EPTN9 Antbody Blockng Peptde | 血小板白细胞C激酶底物2封闭多肽 |
| WF1 Antbody Blockng Peptde | 磷酸化氨基末端激酶1/2/3封闭多肽 |
| PAH Antbody Blockng Peptde | 锌指蛋白200封闭多肽 |
| CDX4 Antbody Blockng Peptde | 整合素α4封闭多肽 |
| NCRNA00114 Antbody Blockng Peptde | 肿瘤坏死因子配体超家族成员4封闭多肽 |
| AMD13 Antbody Blockng Peptde | Obestatin (human) (trifluoroacetate salt)转录延伸因子pt4封闭多肽 |
| Ora2 Antbody Blockng Peptde | HA4蛋白封闭多肽 |
| HOOK3蛋白封闭多肽 | 锌指蛋白860封闭多肽 |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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