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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温
- 保质期:
见标签
- 库存:
99
- 供应商:
Gibco
- 规格:
10L
DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)是一种广泛使用的基础培养基,可用于支持很多种类的哺乳动物细胞生长。已经在 DMEM 中成功培养出的细胞包括原代成纤维细胞、神经元、胶质细胞、HUVEC、平滑肌细胞,以及 HeLa、293、Cos-7 和 PC-12 等细胞系。针对广泛的细胞培养应用,提供了多种组分的 DMEM 改良培养基。使用培养基选择工具查找适合的配方。
这种 DMEM 的改良方式如下:
包含不含
•高糖
•HEPES
•L-谷氨酰胺
•碳/酸氢/钠
•酚红
• 丙/酮酸钠
可提供完整配方。
使用 DMEM
DMEM 与其他培养基的不同之处在于其含有相当于初始 Eagle 最低必需培养基 4 倍浓度的氨基酸和维生素。DMEM 最初采用低浓度葡萄糖 (1 g/L) 和丙/酮酸钠配制,但通常在含/不含丙/酮酸钠的高糖环境下使用。DMEM 不含蛋白质、脂质或生长因子。因此,DMEM 需要补充营养成分,通常需要添加 10% 胎牛血清 (FBS)。DMEM 使用碳酸氢钠缓冲系统 (3.7 g/L),因此需要 5–10% CO2 环境来维持生理 pH 值。粉末形式的 Gibco™ 细胞培养基在配制时需要补充碳酸氢钠、调节 pH 并过滤(详情请参阅实验方案)。
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文献和实验一、常规的试剂配制: 1、培养基:选用高糖型DMEM/F12 (1:1)培养基干粉(含15 mmol Hepes),每升培养液中加入碳酸氢钠1.8 g,调节pH值7.0,0.22 μm的微孔滤膜过滤除菌后,加入谷氨酰胺、无菌的青霉素和链霉素液,使其终浓度分别为0.5 mmol/L 、100 U/ml和100 μg /ml,分装后置于4℃保存,临用前加入2%的B27。神经细胞代谢旺盛,选用高糖型培养基;谷胱甘肽可保持培养
怎么配置 这是w/v浓度。20%BSA的配制方法:在无菌条件下,称取20.00克牛血清白蛋白(BSA),用DMEM培养基[DMEM(高糖)购自Gibco BRL公司]溶液溶解后定容到100毫升,调pH值至7.4后用0.45 um滤膜过滤除菌(较难过滤),最后放入4℃冰箱保存。 4.体积分数为0.5%的牛血清白蛋白(BSA)如何配制?用水配还是用别的溶剂呢? 如果是做ELISA之类免疫学实验,用PBS就可以了,0。5%就是称0。5克BSA然后溶在100mlPBS里面
细胞留在试管中,所以在Hoechst染色时必须用聚丙烯试管。当要染大量细胞时,在250ml聚丙烯试管中最为便利。 3 加入Hoechst至终浓度为5μg/ml。我们建议用200 的原液(1 mg/ml),它是将一整瓶Hoechst粉末溶于水中(B2261, Sigma),再分装,保存浓缩的Hoechst溶液在-20℃ 4 将细胞在37℃循环水浴箱中预热,在90 min 的孵育中定期混匀试管。时间和温度对于Hoechst染色来说特别关键,所以DMEM必须预热而且试管必须完全没
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