4ml细胞培养管

流式细胞术实验流程

刺激的细胞，直接将刺激后的细胞悬浮在细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)中，然后进行第2步。 1.2 加满细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS), 300g离心细胞悬液5分钟，弃掉上清。 红细胞裂解 2.1 如需裂解红细胞（如脾脏），将10x红细胞裂解液(ACK buffer)用去离子水稀释到1x，放置到室温。将细胞重悬于3mL的1x ACK buffer中，室温孵育2-3分钟；如不需要裂解红细胞，直接进入第3步,。 2.2 加入10mL细胞染色buffer(或含1%BSA

噬斑的扩增

[材料和试剂] （1）恒温摇床 （2）培养管 （3）LB培养基 （4）甘油 [操作步骤] （1）以LB培养基稀释ER2537过夜培养物。1ml分装至培养管，每管中接种一个克隆。第三轮筛选后，每10个克隆就可能获得一个共同序列。 （2）使用消毒牙签或枪头，穿刺噬斑，接种至上述培养管中。注意：要挑选噬斑数不超过100的平板上的噬斑，从而保证每一个噬斑仅包含单个DNA序列。 （3）37℃振摇孵育4.5~5h（不能过长

支原体的分离培养鉴定

拭子插入尿道口内2—4cm处轻轻旋转取分泌物；也可取前列腺液或精液培养。必要时也可用尿液作支原体培养，取清晨第1次尿的中段尿10—20ml，经2000rpm离心10分钟，取沉渣接种，但尿液支原体培养阳性率明显低于尿道分泌物。 女性：用扩阴器扩阴后，用女性拭子在宫颈口内1—2cm处轻轻旋转取宫颈分泌物；也可用羊水培养。不推荐用尿液。 【培养】 1、培养管复温取出所需要数量的培养管，复温至室温，作好标记。 2、接种将拭子插入培养管，旋转并挤压数次，使拭子中支原体渗入液体中