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低温
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见标签
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99
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Gibco
- 规格:
20mL
GIBCO™ 抗细胞结团剂是一种浓缩型液体试剂,其可以减少细胞结团,有助于在悬浮培养中获得更高的活细胞密度。抗细胞结团剂是一种温和、非动物源性且化学成分确定的制剂,不含蛋白质、酶、水解物或未知成分的组分。
•在悬浮培养中减少细胞结团
•更高的活细胞密度
•非动物源性和化学成分确定的组分
•即用型大尺寸便捷包装
•可自定义配置包装和交付
简单且温和的细胞解离
驯化适应悬浮培养的细胞系可以恢复为粘附性或聚集性更强的“结团”状态。在这种情况下,通过添加温和试剂减少结团和粘附(而不是细胞解离产品中常见的苛刻酶)可极大改善培养条件。抗细胞结团剂是一种简单、温和的浓缩型溶液,将其加入培养基(通常以 1:100 至 1:1000 的稀释度滴定)后,可明显减少细胞结团。
减少结团,增加活力,提高蛋白表达
下面图示说明了使用抗细胞结团剂减少细胞结团的效果(图 1)。另请参见证明活细胞密度得以改善的相关数据(图 2)。更高的活细胞密度有助于稳定培养条件,增加蛋白产率。
对于实际工作中的细胞解离,建议使用非动物源性 TrypLE™ 产品。
转染后使用抗细胞结团剂
在所有悬浮细胞培养条件下都不建议使用抗细胞结团剂。例如,通过阳离子脂质体转染创建细胞系时,抗细胞结团剂可能会干扰转染过程,在此种情况下我们建议在转染后使用抗细胞结团剂。
非动物源性且化学成分确定的组分
因为抗细胞结团剂完全由非动物源性且化学成分确定的组分制成,所以客户可以确信在培养系统中加入外源性物质的风险已降至尽可能低。避免系统中出现成分不明的添加剂可确保不同批次间的结果更稳定。
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文献和实验1-1所示。 表1-1 离子交换剂的类型与特点 交换剂 名 称(纤维素) 作 用 基 团 特 点 阴离子交换剂 二乙氨基乙基 DEAE+-O-C2H4N+(C2H5)2H 最常用在pH8.6以下 三乙氨基乙基 DEAE+-O-C2H4N+(C2H5)2H 氨乙基 AE+-O-C2 H4-N H2 胍乙基 强碱性、极高pH仍有效 阳离子交换剂 羧甲基 CM—-O-CH2-COO— 最常用在pH4以上 磷酸 P--O- P O2-
血清10%的RPMI1640培养基培养;嵌合抗CD20 Fab表达载体pYZFcd20由我室构建;大肠杆菌16C9为我室所存;Rituxan购于罗氏公司。2、方法(1)嵌合抗CD20 Fab表达及分离纯化嵌合抗CD20 Fab表达及分离纯化如以前所述[8],简单说,挑取单菌落pYZFcd20转化的16C9菌株接种5ml含氨苄青霉素50g/ml的2×YT培养基,37℃,200rpm,振荡培养6小时;离心收集菌株,将菌株重新悬浮于20ml含氨苄青霉素50g/ml的AP5培养基,诱导表达培养24小时;离心
免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):IgG的分离与提纯
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