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血红链球菌PCR阳性对照质粒

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  • 2025年07月12日
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    • 供应商

      上海圻明生物

    • 规格

      2μg

    血红链球菌PCR阳性对照质粒上海圻明生物优势供应。更多产品资料欢迎免费咨询。

    One of the many important uses of PCR technology is that it can be used to label DNA probes with high specific activity. PCR technology has high specificity, and can synthesize probe DNA fragments in quantities within 1~2h if [α-32P]dNTP or other markers are added to the substrate
    dNTPs, the probe DNA can be well labeled during DNA synthesis, and the incorporation rate of the marker can be as high as 70%~80%. Therefore, PCR labeling technology is particularly suitable for large-scale detection and non-radiolabeling. The disadvantage of this method is that a specific pair of PCR primers is synthesized.
    Labeling can also be achieved by using small fragments prepared from probe DNA as primers.

    Solution preparation

    1. Prepare a stock solution

    Unless otherwise stated, all unused stock solutions should be divided into disposable aliquots and stored at -20 °C after preparation. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
    1.1* Acid Stock Solution (125X):
    Add 20 μL DMSO to *ate (component B) to make a 125X* acid stock solution. 

    2. Prepare standard solutions

    *Salt standard solution
    Add 50 μL of 1 mM KH2PO4 (Component C) to 950 μL of deionized water or enzyme reaction buffer to give a 50 μM * saline standard solution (PS7). A 50 μM * saline standard solution (PS7) was taken and serially diluted 1:2 to obtain a serially diluted phosphate standard with deionized water or enzyme reaction buffer.

    3. Prepare a working solution

    Add 20 μL of 125X* stock solution to 2.5 mL of sterile H2O and mix well to make a working solution of *salt. Avoid potential Pi contamination. Note: Avoid direct exposure of *salts (component B) to light. Due to the high sensitivity of this assay to Pi, it is extremely important to use Pi-free labware and reagents.

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    图标文献和实验
    相关实验
    • 荧光定量 PCR——想要实验结果可靠,各种对照不可少

      或者 Ct 值偏大的样本孔,到底是真的没有要检测的对象,还是扩增有问题,亦或是提取中的问题?为了发现这种假阴性的发生,合理的阳性对照可以监控实验的不同步骤: 扩增对照 Amplification Control 可使用含有扩增片段的质粒、假病毒或者基因组 DNA/cDNA 作为扩增阳性对照,监控荧光定量 PCR 的体系是否正常,包括酶、引物、探针等。如果检测中包含多个目标片段,可以将这些目标片段都克隆到同一个质粒中,方便制备和使用。当扩增对照没有扩增,或者 Ct 值大于预期,则说明定量 PCR

    • 外源基因在原核细胞表达技术

      与表达载体连接。   3.      重组质粒转化有 lacI q 等位基因的大肠杆菌菌株。如果质粒本身有 lacI 基因,可以使用任何适当的大肠杆菌菌株。将转化体铺于含氨苄( 50 μ g/ml )的 LB 平板,于 37 ℃过夜培养。   4.      通过菌落杂交和 / 或小量制备质粒的限制酶切分析、寡核苷酸杂交或序列分析筛选带有插入片段的转化体。       诱导靶蛋白表达的优化

    • PCR在临床检验中的应用

      ,在实际应用中受到限制。PCR 在结核菌检测方面有简便、敏感、特异的优点。一般认为样本中内要有100个左右的结核菌即可被检出。目前用于结核菌PCR 诊断的试剂,其引物主要来源于以下基因片段36KD/65KD抗原蛋白基因;染色体重复插入序列IS986、IS960、IS6110、染色体质粒DNA PH7311、PMTB4、P36基因等。其中最常用的是染色体重复插入序列IS986或IS6110,1990年Hermans首先介绍并使用了IS986基因设计的引物扩增产物为245BP,研究表明这一基因对人型

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