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- 2025年07月08日
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低温
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详见说明
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99
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上海圻明生物
- 规格：
2μg
副流感病毒4b型RT-PCR阳性对照质粒上海圻明生物优势供应。更多产品资料欢迎免费咨询。
One of the many important uses of PCR technology is that it can be used to label DNA probes with high specific activity. PCR technology has high specificity, and can synthesize probe DNA fragments in quantities within 1~2h if [α-32P]dNTP or other markers are added to the substrate
dNTPs, the probe DNA can be well labeled during DNA synthesis, and the incorporation rate of the marker can be as high as 70%~80%. Therefore, PCR labeling technology is particularly suitable for large-scale detection and non-radiolabeling. The disadvantage of this method is that a specific pair of PCR primers is synthesized.
Labeling can also be achieved by using small fragments prepared from probe DNA as primers.
Solution preparation
1. Prepare a stock solution
Unless otherwise stated, all unused stock solutions should be divided into disposable aliquots and stored at -20 °C after preparation. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
1.1* Acid Stock Solution (125X):
Add 20 μL DMSO to *ate (component B) to make a 125X* acid stock solution.
2. Prepare standard solutions
*Salt standard solution
Add 50 μL of 1 mM KH2PO4 (Component C) to 950 μL of deionized water or enzyme reaction buffer to give a 50 μM * saline standard solution (PS7). A 50 μM * saline standard solution (PS7) was taken and serially diluted 1:2 to obtain a serially diluted phosphate standard with deionized water or enzyme reaction buffer.
3. Prepare a working solution
Add 20 μL of 125X* stock solution to 2.5 mL of sterile H2O and mix well to make a working solution of *salt. Avoid potential Pi contamination. Note: Avoid direct exposure of *salts (component B) to light. Due to the high sensitivity of this assay to Pi, it is extremely important to use Pi-free labware and reagents.
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文献和实验而导致不孕。接着对这五名患者及家系中的其他成员，加上另外 23 个患病家系的 DNA 样本，利用 sanger 测序检测候选基因 TUBB8 的突变情况。然后利用 RT-PCR 技术检测卵母细胞、早期胚胎、精子细胞和部分组织中的 TUBB8 和其他 β-微管蛋白亚型的表达。 α-微管蛋白多肽和 β-微管蛋白多肽组装形成异二聚体，研究人员利用实验评估 TUBB8 突变是否影响体外异二聚体组装、HeLa 细胞系中的微管结构、酵母细胞中的微管动力学以及小鼠和人类卵母细胞的纺锤体组装
同时进行阳性对照 siRNA 和阴性对照 siRNA 实验。阴性对照实验进行时需要使用与所有基因序列不同的序列（就是说没有 RNAi 效果的序列），阳性对照实验需要使用高效的 RNAi 序列。需要提前确认进行 RNAi 细胞 RNAi 的干扰效果（RNAi 效果的持续性和表达抑制效率）和再次进行独立实验确定重复性。但是 DNA 质粒和合成 siRNA 的转染的最适条件不一样，必须要使用最适合合成 siRNA 的条件。 *可以使用以下三种中其中一种： 市售的对照 siRNA（基因
人类生殖繁衍主要依赖于成熟卵细胞和精子融合形成的受精卵，但是阻滞人卵细胞成熟的遗传机制至今未知。 研究人员利用外显子组测序技术对不孕症患者四代家系中的五名成员进行研究，其中三名患者因卵母细胞第一次减数分裂受到抑制而导致不孕。接着对这五名患者及家系中的其他成员，加上另外 23 个患病家系的 DNA 样本，利用 sanger 测序检测候选基因 TUBB8 的突变情况。然后利用 RT-PCR 技术检测卵母细胞、早期胚胎、精子细胞和部分组织中的 TUBB8 和其他 β-微管
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