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见标签
- 英文名:
SWS-14-DATP
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现货
- 供应商:
Invitrogen
- 规格:
50nmol
生物素-14-dATP 是一种获得专利的 dATP 类似物,生物素通过 14-原子连接子连接到嘌呤碱基的 6 -位置。较长的 14-原子间隔臂易于接近链霉素亲和素,以对原位和基于过滤器的杂交中的探针-靶标杂交进行灵敏度检测。在存在 dCTP、dGTP 和 dTTP 的情况下,可通过切口平移将生物素-14-dATP 高效掺入 DNA 中 (1)。可使用末端脱氧核苷转移酶将生物素-14-dATP 添加到 DNA 的 3´' 端 (2)。提供的量足以通过切口平移标记高达 50μg 的 DNA。
性能和质量检测:通过反相 HPLC 分析评价纯度。
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文献和实验【转帖】一种快速,灵敏的,经济的测序方法--焦磷酸测序 介绍
首先通过PCR制备待测序的DNA模板,PCR的引物之一是用生物素标记的。PCR产物和偶连avidin的Sepharose微珠孵育,DNA双链经碱变性分开;纯化得到含生物素标记引物的待测序单链,并和测序引物结合成杂交体。 Pyrosequencing技术是由四种酶催化的同一反应体系中的酶级连反应,四种酶是:DNA聚合酶(DNA polymerase)、硫酸化酶(ATP sulfurylase)、荧光素酶(luciferase)和双磷酸酶(apyrase).反应底物为adenosine 5′
)甲醇溶液,轻轻悬浮细胞, 4 ℃固定细胞 15 分钟。 4 ℃离心 500 × g 10 分钟,去上清液。 3. 加入 0.1ml 0.1 % Triton X-100 , 4 ℃ 15 分钟。用 1 % BSA-PBS 洗涤细胞 2 次。加入 50 μ l 缺口翻译缓冲液( 50mmol/L Tris-HCl pH7.4 , 5mmol/L MgCl2 , 1.5U 大肠杆菌 DNA 多聚酶 I , 50nmol/L 生物素 -14-dUTP , 50nmol/L dATP
0.1ml 0.1% Triton X-100,4℃15分钟。用1% BSA-PBS洗涤细胞2次。加入50μl缺口翻译缓冲液(50mmol/L Tris-HCl pH7.4,5mmol/L MgCl2, 1.5U大肠杆菌DNA多聚酶I,50nmol/L 生物 素-14-dUTP,50nmol/L dATP, 50nmol/L dGTP, 50nmol/L dCTP),37℃反应60分钟。用冷PBS洗涤细胞2次,悬浮于0.1ml预冷的1% BSA-PBS中。 4.
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