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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SNU1200
- 库存:
10
- 供应商:
雅吉生物
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
详见説明
- 物种来源:
人,小鼠,大鼠等物种
- 细胞形态:
上皮
- 器官来源:
SNU1200
- 运输方式:
顺丰速运
- 年限:
长期
- 生长状态:
贴壁或悬浮
- 规格:
1×10^6cells/T25培养瓶
产品名称:SNU1200细胞
货期:购买前请咨询我们确认是否有现货
规格:1×10^6cells/T25培养瓶
运输:复苏发货包邮,冻存发货需加干冰运费费
带鉴定报告:
SNU1200细胞培养条件:
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培养条件 |
气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ | ||
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传代方法 |
第一次建议1:2传代 |
传代情况 |
2天换液 |
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备注 |
建议同时购买完培,同时购买非常优惠,具体培养体系联系我们 | ||
细胞收到后处理
培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(最好40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售后依据,不提供照片默认收到状态良好。(换液后将瓶盖拧松)
SNU1200细胞细胞培养步骤
a、细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的完全培养液收集至离心管中,留5ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养。
贴壁细胞传代步骤如下:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,使之完全脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL完全培养基重悬。
4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。
悬浮细胞传代步骤日下:
1、半换液法
半换液处理,竖着培养瓶在培养箱静置1小时左右,轻轻吸掉3ml左右培养基,然后补给3ml的完全培养基,如果培养基变色慢,可直接加500ul左右FBS,传代的时候可以直接补给5ml培养基 分两个培养瓶培养,一般这样传代3次左右可以离心传代一次,去掉死细胞。
2、离心换液法
如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

b、细胞冻存:
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;
3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。
4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要将细胞转入液氮罐中,则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上再转入液氮罐中。
C、细胞复苏:
1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4、第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
注意事项:有些细胞贴壁不牢,在运输过程中容易发生细胞脱落,这是正常现象。如脱离较多可将培养瓶所有培养液收集至离心管,1000rpm离心5min,收集上清作过渡培养(后期对比培养),沉淀加入胰酶1-2ml,轻轻吹打,重悬,消化1-2分钟后,加5ml完全培养基终止反应。再离心,弃上清,加1-2ml完全培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代(两个T25),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养。
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文献和实验-CAM是两种黏蛋白调节的关键基因。无论是β黏蛋白还是盘状球蛋白的过度表达在多种细胞中诱导Nr-CAM,而且LEF/TCF启动子结合端要求黏蛋白而激活。经反转录病毒将Nr-CAM转入NIH3T3细胞刺激细胞的生长,增强细胞的运动,诱使细胞转化,以及是在裸鼠中迅速导致肿瘤的生长。Nr-CAM和LEF-1在人结肠癌组织和人黑色素瘤细胞株中有过高表达,但在黑色素细胞和正常人结肠组织中的表达正常。LEF-1阴性降低Nr-CAM的表达,抗Nr-CAM抗体可抑制B16黑色素细胞的运动。结果提示β黏蛋白和盘状球蛋白
(Pantelouris)发现裸小鼠已失去正常胸腺,原胸腺残留结构中,部分上皮样细胞呈巢状排列而部分呈外分泌腺结构;淋巴结内胸腺依赖区的淋巴细胞消失,外周血中的淋巴细胞数目减少。1969年丹麦的里加尔德(Rygaard)首次将人结肠癌移植到裸小鼠并获得成功,为免疫缺陷动物的研究和应用开创了新局面。主要特性:①无毛、裸体、无胸腺。随着年龄增长,皮肤逐渐变薄、头颈部皮肤出现皱折、生长发育 迟缓。②由于无胸腺而仅有胸腺残迹或异常胸腺上皮(该上皮不能使T细胞正常分化),导致 缺乏成熟的T淋巴细胞,因而细胞免疫功能低下。但6~
等建立了新的MSH6的连锁,在某些结肠癌中的DNA错配修复蛋白,属于PMS1错配修复家族,其中的突变也与人结肠癌、嘌呤生物合成途径、RNA修饰酶和一个未知的蛋白质家族相关,这样它们可以通过核酸修复或修饰来研究。 这样的注释精确度如何?能覆盖多少比例的蛋白质?这些问题只能部分提出,因为参考的功能连锁蛋白质不是很容易得到。Marcotte和同事给酵母2,557个未知蛋白的一半预测了一般功能。他们估计成对预测来确定功能的近30%是错误的,虽然两到三种方法联合应用使错误率降到15%。
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