真空过滤系统 150ml 0.22umCA(醋酸纤维）膜 5

培养基的配制和灭菌

素B1、B12、C和泛酸、抗生素、酶、植物 提取液（活性丧失）。所以，原生质体培养用培养基应采用过滤法灭菌。 表4 培养基或无菌水的最少灭菌时间 容器分装体积（mL） 121℃下最少灭菌时间（min） 20~60 15 75~150 20 250~500 25 1000以上 30以上 过滤灭菌可以除去溶液或液体培养基中直径大于过滤膜网孔直径的微粒、微生物 和病毒。与高压蒸气灭菌法相比，该法不会改变那些在高压蒸气灭菌中不稳定物质，但是也有些明显的缺点

消毒与灭菌

灭菌　利用高潮杀死微生物的方法，称为热力灭菌。微生物组成的最重要成份是蛋白质、核酸等，当高潮时会引起蛋白质和核酸不可逆的变性或凝固，使细胞失去了生理机能，停止生长发育，直至生化瓜停止而终止生命。此外高温尚可破坏细胞的　其他组成，或者使细胞的脂肪膜受热溶解而形成了极大的孔，导致细胞内含物泄漏而引起死亡，从而达到高潮灭菌的效果。 　　热力灭菌经常使用两个杀菌指数：热死温度和热死速度。前者指在１０分钟内可以杀死细菌悬液中所有细胞的温度，后者指在一定温度下，杀死所有细胞所需的时间。在同样

组织培养时各种灭菌特点

值高于5.5，则维生素B1会被迅速降解。泛酸钙、植物组织提取物等要过滤灭菌，不能高温灭菌，否则会失去作用。防细菌滤膜的网孔的直径为0.45微米以下，当溶液通过滤液后，细菌的细胞和真菌的孢子等因大于滤膜直径而被阻，在需要过滤灭菌的液体量大时，常使用抽滤装置；液量小时，可用注射器。使用前对其高压灭菌，将滤膜装在注射器的靠针管处，将待过滤的液体装入注射器，推压注射器活塞杆，溶液压出滤膜，从针管压出的溶液就是无菌溶液。 过滤除菌操作步骤：首先将过滤器、接液瓶用纸包好，滤膜可放在培养皿内用纸包好。使用前先经121℃高压蒸汽灭菌