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上海熹垣生物
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25个/包;20包/箱
货号:XY-430829
离心管 50ml 锥形底 平盖 PP(聚丙烯)材质 灭菌(cf 430052),25个/包,20包/箱
上海熹垣生物优势供应!
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文献和实验试剂将6 μg Pac I 处理过的质粒转染细胞; 4. 8 个小时后移去混合液,加入4 ml DMEM 完全培养液(10% CBS,1%Pen/Strep); 5. 在转染后7 到10 天用细胞刮(而不是胰酶)将细胞从瓶中刮下并移入50ml锥形管。离心后将细胞重悬于2.0 ml PBS 或全培液中。于液氮中冻结细胞,37℃水浴中溶解,剧烈振荡。此步骤共进行4 次。注意保存时不要反复冻融,可保存于-20℃; 6. 将293 细胞以50-70%的汇合率铺于60 mm 培养盘中,以30-50%的体积
,其泳动率才与分子量成正比。 判断RNA提取物的完整性是进行电泳的主要目的之一。完整的未降解的RNA制品的电泳图谱应可清晰看到18s rRNA、28s rRNA、5s rRNA的三条带,且28s rRNA的亮度应为18s rRNA的两倍。 三、材料、试剂及器具 1、 材料 总RNA提取物。 2、 试剂 (1)0.1%DEPC水:200ml双蒸去离子水加0.2mlDEPC焦炭酸、二乙酯混匀,室温放置过夜,高压灭菌。
苯蓝。 (6)甲酰胺(去离子)。 3、器具 (1)电泳系统 (2)紫外透视仪 四、操作步骤 1、 将制胶用具用70%乙醇冲洗一遍,晾干备用。 2、 制胶: 称取0.5g琼脂糖粉末,加入放有36.5mL的DEPC水的锥形瓶中,加热使琼脂糖完全溶解。稍冷却后加入5mL的10x电泳缓冲液、8.5mL的甲醛。然后在胶槽中灌制凝胶,插好梳子,水平放置待凝固后使用。 3、 加样: 在一个洁净的小离心管
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