Transwell-膜嵌套，6.5mm膜直径，0.4um，P

转基因小鼠模型的建立(SOP)

、自动小夹、带弯针4/0丝线及持针器、直径为10cm塑料 Petri氏培养皿（内盛70%乙醇）。2．手术前麻醉2，2，2 三溴乙醇（阿佛丁）是相当有效的麻醉剂。因该试剂对光敏感，所以应该于4度避光保存，新试剂用前应进行测试。经腹腔注射三溴乙醇麻醉小鼠后，为了使麻醉剂尽快发生作用，将小鼠放回原笼熟悉的环境中，小鼠将会更容易松驰下来。 挤压小鼠脚垫，如果小鼠能感觉到此刺激，小鼠将从挤压部位开始缩腿运动（pedal reflex），用此方法可以检察是否麻醉完全。实验中小鼠无缩腿运动、小鼠达到手术所需的麻醉

细胞培养技术扫盲——入门必知篇

、250ml、100ml生理盐水瓶或血浆瓶代替。 （2）培养瓶：根据培养细胞种类要求不同培养瓶的形态各异，用于细胞传代培养的细胞要求瓶壁厚簿均匀，便于细胞贴壁生长和观察，瓶口要大小一致，口径一般不小于1cm，允许吸管伸入瓶内任何部位，规格有200ml、100ml、50ml、25ml、10ml等几种。用于外周血培养的常用10ml普通圆瓶。两种培养瓶均要求选用优质玻璃制成。 （3）培养皿：用于开放式培养及其它用途。分直径30mm、60mm、120mm等几种。 （4）吸管：常用的有长吸管和短吸管两类

分子生物学常用实验技术（page 2)

（>400ci/mmol)，EDTA(50mM 和200mM)，TE 饱和酶/氯仿，7.5mM NH4Ac，100%和70%乙醇，TE 缓冲液(10mM Tris?Cl,pH8.0,1mm EDTA)。 2、操作步骤： （1）取一灭菌的无RNA 酶的eppendorf 管加入的RNA 样品，及引物或引物-延接头，用H2O 调节0.5mg 引物/mg mRNA（或0.3mg NotⅠ引物-延接头/mg mRNA）的体积至15ml，70℃加热5 分钟，待冷至室温，离心数秒钟使溶液集中在管底，然后依次