96孔FiltrEX滤板液体保护板

最全面的MTT大汇总

药物的介质，而加药组加入不同浓度的药物。8.避免血清干扰。用含15％胎牛血清培养液培养细胞时，高的血清物质会影响试验孔的光吸收值。由于试验本底增加，会试验敏感性。因此，一般选小于10％胎牛血清的培养液进行。在呈色后，尽量吸净培养孔内残余培养液。实验步骤贴壁细胞：1.收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。2.5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板）,加入浓度梯度的药物,原则上，细胞贴壁后即可

常用消毒灭菌除菌器的使用

器。 1. 构造 ①赛氏(Seitz)滤菌器(图3-2)：由三部分组成。上部的金属圆筒，用以盛装将要滤过的液体；下部的金属托盘及漏斗，用以接受滤出的液体；上下两部分中间放石棉滤板，滤板按孔径大小可分为三种：K滤孔最大，供澄清液体之用；EK滤孔较小，供滤过除菌；EK-S滤孔更小，可阻止一部分较大的病毒通过。滤板依靠侧面附带的紧固螺旋拧紧固定。 ②玻璃滤菌器（图3-3）：由玻璃制成。滤板采用细玻璃砂在一定高温下加压制成。孔径由0.15～250 μm不等，分为G1

MTT实验心得

参考，理由如下：我们常规加入的MTT是过量的，反应4h后96孔板的溶液仍是黄色，改变较小，这表明MTT加入的量的确是过量的。过量的底物与酶反应实际上是零级动力学过程，即酶已经被底物饱和。如果再增加底物浓度实际上也改变不了一定时间内的产物量。也就是说，底物再增加10倍，要想获得原先的吸光度，以前用3h，现在可能还是要用将近3h。因此意义较小。当然，我用的是理论分析，应该以实验为依据。仅供你参考，如果能明显缩短反应时间那么还是很有意义的。问：我前两天做了两板，孵育四小时候，把液体倒出時发现MTT还原