抗小鼠 C1q 单克隆抗体

单克隆抗体技术：抗体检测

，然后倍比稀释至一定的稀释度； ② 加入 0.1ml 补体和 1 ％绵羊红血球 0.1ml ，混匀后置 37 ℃ 水浴 1h ； ③ 观察结果，以绵羊红血球完全溶解的杂交瘤细胞培养液的最高稀释倍数为抗体的溶血效价。 2 ．斑点检测法 抗红血球表面的单克隆抗体与浇灌在琼脂板的红血球结合，进而结合补体，而发生溶血斑点，对着光源用肉眼即可判定。 （ 1 ）材料：①绵羊红血球，处理同试管法，最后配成 25 ％红血球悬液； ② 新鲜豚鼠血清（同试管法处理）； ③

单克隆抗体技术简介

％，则说明冻存复苏过程有问题。 　　单克隆 抗体的纯化 　　单克隆 抗体的纯化方法同多克隆 抗体的纯化，腹水特异性抗体的浓度较抗血清中的多克隆 抗体高，纯化效果好。按所要求的纯度不同采用相应的纯化方法。一般采用盐析、凝胶过滤和离子交换层析等步骤达到纯化目的，也有采用较简单的酸沉淀方法。目前最有效的单克隆 抗体纯化方法为亲和纯化法，多用葡萄球菌A蛋白或抗小鼠球蛋白抗体与载体（最常用Sepharose）交联，制备亲和层析柱将抗体结合后洗脱，回收率可达90％以上。蛋白可与IgG

（共享）单克隆抗体技术

交换层析等步骤达到纯化目的，也有采用较简单的酸沉淀方法。目前最有效的单克隆抗体纯化方法为亲和纯化法，多用葡萄球菌A蛋白或抗小鼠球蛋白抗体与载体（最常用Sepharose）交联，制备亲和层析柱将抗体结合后洗脱，回收率可达90％以上。蛋白可与IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3结合，同时还结合少量的IgM。洗脱液中的抗体浓度可用紫外光吸收法粗测，小鼠IgG单克隆抗体溶液在A280nm时，1.44（吸光单位）相当于1mg/ml。经低pH洗脱后在收集管内预置中和液或速加中和液对保持纯化抗体的活性至关