TPH1 (phospho Ser260) 多克隆抗体

蛋白印迹常见问题指南

剂就要温和得多，这时最好加上NaF去抑制磷酸化酶的活性。 G. 我的样品的蛋白含量很低，每微升不到1微克，但是在转膜时经常会发现只有一部分蛋白转到了膜上，就是在转膜后染胶发现有的孔所有的蛋白条带都在，只是颜色变淡了，有什么办法可以解决？ 解答：你可以加大上样量，没有问题，还有转移时你可以用减少电流延长时间，多加5－10％甲醇。 H. 想分离的蛋白是分子量260kd的，SDS-PAGE电泳的分离胶浓度多大合适？积层

【讨论】 抗体工程技术讨论

抗体工程： 抗体研究领域的进展大致可分为3个阶段： （1）以1890年Behring发现白喉抗毒素为代表，其特点是用抗原免疫动物来获得多克隆抗体。 （2）以1975年Kohler创建杂交瘤技术制备单克隆抗体为代表。 （3）以1994年Winter以基因工程方法制备抗体为代表。这是抗体研究领域出现的又一次技术革命，它不用人工免疫动物和细胞融合技术，完全用基因工程技术制备人源性抗体，而且还能利用基因转移和表达技术，通过细菌发酵或转基因动物、植物大规模生产抗体。在此基础上发展成抗体

穷人的劳斯莱斯—五年 western blot 体会

（3400 元/100 微升），而且说是 100 微升，但至多能吸出来 90 微升；Sigma 的价最贵；比较有性价比的是 CST 的抗体，现在好像是 2200 元/100 微升，我前后用过二十几种， 1:1000 的稀释比下，还没有失过手，100 微升通常能完成所有的免疫组化和 western blot 实验，还有一个优点是通常量比 100 微升多出来 10 微升，唯一的不足是 CST 的品种实在不多。Santa 的多克隆抗体质量可以，但是选用 Santa 的单抗还是有风险，估计这也是业界共识