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北京诺博莱德科技有限公司
Hoechst33342也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342,分子式为C27H28N6O?
3HCl?3H2O,分子量为615.99,CAS Number 23491-52-3。Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低,常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测,Hoechst33342也用于普通的细胞核染色、DNA染色。Hoechst33342的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nm,Hoechst33342和双链DNA结合后,最大激发波长为352nm,最大发射波长为461nm。
Hoechst 33342染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
用途:细胞周期分析、活细胞染色等
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文献和实验四、醋酸洋红染液 将洋红粉末1g倒入100mL45%醋酸溶液中,边煮边搅拌,煮沸(沸腾时间不超过30s),冷却后过滤,即可使用。也可再加入1%~2%铁明矾水溶液5-10滴,至此液变为暗红色而不发生沉淀为止。如制作永久标本染色时,可加入饱和氢氧化铁或醋酸铁(媒染剂)溶液数滴,至染色液呈浅蓝色为止。 五、硫堇染液(工作液) ①干液(硫堇):硫堇1g或2g溶于100mL 50%乙醇中,溶解后过滤备用; ②醋酸钠缓冲液:醋酸钠・3H2O 9.7g,巴比
%乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍,再用细胞培养液洗涤一遍。将盖玻片置于六孔板内,种入细胞培养过夜,使约为50%-80%满。B. 刺激细胞发生凋亡后,吸尽培养液,加入0.5ml固定液,固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。C. 去固定液,用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟,吸尽液体。洗涤时宜用摇床,或手动晃动数次。D. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液,染色5分钟。也宜用摇床,或手动晃动数次。E. 用PBS
,这次实验我们控制在75V,走过浓缩胶后电压调为120V。电泳时观察凝胶板上的样品溴酚蓝的色条带走至近底端1cm时,停止电泳。关闭电源。然后从电泳槽内小心取出凝胶板。 6) 染色 a) 用刀片或薄板将凝胶板外的两块玻璃板轻轻撬开,使凝胶倾伏在其中一块玻璃板上。 b) 用刀片在凝胶上沿分离胶与浓缩胶的交接处,将分离胶切下,并在分离胶的左上角切掉一小角,以标记样品顺序。 c)然后将分离胶小心移入染色器皿中。 d)在染色器皿中加入100ml染色液,加盖,染色3小时。 7)脱色 将染色液倒
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