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PBS是磷酸缓冲盐溶液(Phosphate-Buffered Saline)的简称,是最常用的磷酸盐缓冲溶液之一,不含钙镁的PBS又称Dulbecco's磷酸缓冲盐溶液、Dulbecco's PBS、D-PBSA、CMF-DPBS、D-PBS、DPBS, 主要由氯化钠、lv化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾组成,不含Ca2+、Mg2+,pH值约为7.4,常用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途,蔗糖具有脱水的作用,常作为脱水剂。
蔗糖-PBS溶液(10%)主要由10%蔗糖和PBS组成,新鲜组织取材后,用该溶液沉淀以去除多余水分,以避免冷冻后产生冰晶。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
用途:新鲜组织取材后,沉淀以去除多余水分,避免冷冻后产生冰晶
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文献和实验磷酸盐缓冲液(简称PBS)的是生物化学中常用的一种阻碍溶液pH变化的缓冲溶液,这种由盐溶液中含有氯化钠,磷酸盐,磷酸盐,氯化钾和磷酸钾组成。组份浓度:137 mM 氯化钠,2.7 mM 氯化钾,10 mM 磷酸二氢钠,2 mM 磷酸二氢钾。本文总结了PBS和D-PBS溶液的配制方法。 1. 常规PBS磷酸盐缓冲液 组成成份: 磷酸二氢钾 34 g 1 mol/L氢氧化钠溶液 175 ml 蒸馏水 825
g Tris-HCl,配成 0.25 mol/L 溶液,0.20 g SDS 配成 0.2% 溶液,溶于 80 ml MQ 水中,调 pH 为 6.8,最后定容至 100 ml。 ( 6 ) SDS-PAGE 电泳缓冲液:9 g Tris-HCl,43.2 g 氨基乙酸,3 g SDS 溶于 3 L MQ 水中。 ( 7 ) 溴酚蓝(BPB ) 溶液:称取 0.1 g BPB 溶于 100 ml 10% 的甘油中。 ( 8 ) 印迹溶液 A:36.33 g Tris
蓝染色 建议:样品用clean-up处理 问题11. 蛋白斑点出现垂直条带 可能原因:平衡过程中DTT不足,导致一些蛋白出现垂直条带。 问题12 样品中含盐等离子过高 可能原因:样品中含盐等离子杂质过高,导致等电聚焦失败。 建议:避免过多盐,需除盐,如在洗细胞时要把PBS在离心后彻底移除,或在最后一步清洗时采用250mM蔗糖/10mM Tris 洗细胞。 问题13 pH6-11的胶
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