- ￥960 - 1560
- BioTNT
- 3.9-15.6pg/ml
- 3.9pg/ml
- 上海
- A1010A0304
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 灵敏度：
3.9pg/ml
- 库存：
99
- 供应商：
上海普时如生物科技有限公司
- 检测范围：
3.9-15.6pg/ml
- 检测方法：
ELISA
- 应用：
定量检测大鼠血清、血浆等样本中白介素-4（IL-4）的含量，用于研究其在免疫调节、过敏反应等方面的作用
- 适应物种：
rat
- 标记物：
HRP
- 样本：
血清、血浆、细胞培养上清液
- 规格：
48wells/96wells
| 规格： | 48wells | 产品价格： | ￥960.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 96wells | 产品价格： | ￥1560.0 |
大鼠白介素 4 酶联免疫试剂盒
Rat IL-4 ELISA Kit
用于血清，血浆，细胞上清及其他生物体液中
大鼠白介素 4 的检测
货号：A1010A0304
96 tests
仅供科研使用，勿用于药物、临床检测
检测原理：
本试剂盒采用双抗夹心法。用抗 Rat IL-4 抗体包被于酶标板上，标准品和样本中的 Rat
IL-4 与单抗结合，加入生物素化的抗 Rat IL-4，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物
酶标记的 streptavidin 与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，最后加终止液，在 450nm 处 测 OD 值，Rat IL-4 浓度与 OD 值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中 Rat IL-4 的浓度。
试剂盒组份（2-8℃保存）
1. 酶标板（coated wells） 96 test；
2. 稀释液 I（Standard Diluent I） 10 ml；
3. 3ng 标准品（standards） 2 vial；
4. 生物素化二抗（Biotinylated Antibody） 11 ml；
5. 亲和链霉素-辣根过氧化物酶结合物（Streptavidin- HRP Conjugate） 11ml；
6. 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） 50 ml；
7. 显色液 A（Color Reagent A） 6 ml；
8. 显色液 B（Color Reagent B） 6 ml；
9. 终止液（Stop Solution） 12 ml；
未提供的试剂、仪器和耗材：
1. 单道或多道（8 道或 12 道）移液器及移液器枪头：10-200ul 和 50-1000ul；
2. 多道（8 道或 12 道）移液器试剂存放槽；
3. EP 管及试剂配置容器；
4. 圆柱形量筒：100mL，200mL，500mL 和 1L；
5. 可在 450nm 处进行读数的酶标仪；
6. 洗瓶或自动洗板机；
7. 蒸馏水或去离子水；
8. 封板膜或板盖；
9. 乳胶手套；
10. 吸水纸；
注意事项：
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室
温 20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中
不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响 OD 值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发出来的强烈气体。任何漂白成分都会
破坏试剂盒中反映试剂的生物活性。
8. 标准孔及待测样本均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线，请合理安排预实验。
9. 不能使用过期产品。
样本与试剂准备：
1. 收集标本：血清，血浆（EDTA，肝素抗凝），细胞培养上清液，组织匀浆等尽早检测，
2-8℃保存 48 小时，更长时间需冷冻（-20℃或-80℃）保存，避免反复冻融。
2. 标准品配制：使用前加入 1ml 稀释液 I 复溶标准品，充分混匀，配成 3ng/ml 的溶液（此
溶液可进行分装，-20℃，有效期约 1 个月）；准备一支空 EP 管，取 400ul 的 3ng/ml
标准品复溶液至空 EP 管中，加入 800ul 稀释液 I，配成浓度为 1000pg/ml 的标准品溶
液（标准曲线最高点）；再准备六支空 EP 管，分别加入 500ul 稀释液 I，吸取 1000pg/ml
的标准品溶液 500ul 加入第一管中，充分混匀，从第一管中取 500ul 加到第二管中，充
分混匀，如此反复对半稀释至浓度 15.6pg/ml 的标准品溶液；另取一空白 EP 管加入足
量的稀释液 I，设为空白对照。
3. Biotinylated Antibody：即用型。平衡到室温后直接使用。
4. Streptavidin-HRP Conjugate：即用型。平衡到室温后直接使用。
5. 显色液配制：A 液和 B 液做 1：1 配制，即配即用，可根据使用量临时配制（不稳定），
不要配制过多的显色液。
6. 1×洗涤液配制：用蒸馏水 1：20 倍稀释（示例：1ml 20×浓缩洗涤液加入 19ml 蒸馏水）；
操作步骤：
1. 加样：加入相对应标准品，待测样品各 100ul，封板，充分混匀置 37℃ 温育 60 分钟；
2. 洗板：用 1×洗涤液将反应板充分洗涤 4 次，在吸水纸上拍干；
3. 每孔加入已稀释 1×Biotinylated Antibody 100ul，封板，置于 37℃ 温育 45 分钟；
4. 洗板：同第二步；
5. 每孔加 1×Streptavidin- HRP 100ul，封板，置于 37℃进行温育 15 分钟；
6. 洗板：同第二步；
7. 每孔加入已配制的显色工作液 100ul，将反应板置暗处室温 10-30 分钟（可以目测实际
显色情况，如显色过深，请及时终止）；
8. 每孔加入 100ul 终止液，混匀；
9. 设置酶标仪主波长 450nm 副波长 630nm 检测吸光度，终止后 30 分钟内读数。
结果计算与判断：
1. 所有 OD 值都应减除空白值后在计算；
2. 以标准品 1000，500，250，125，62.5，31.25，15.625，0pg/ml 为横坐标，OD 值为纵
坐标，画出标准曲线。
3. 根据样本 OD 值在该曲线图上查出相对应 Rat IL-4 含量，如样本有稀释，请再乘上稀释
倍数。
| Standard (pg/mL) | O.D. (450 nm) | Mean | Zero Standard Subtracted (Std.)-(S1) |
| 1000 pg/ml | 2.046，2.076 | 2.0610 | 1.9650 |
| 500 pg/ml | 1.093，1.077 | 1.0850 | 0.9890 |
| 250 pg/ml | 0.577，0.586 | 0.5815 | 0.4855 |
| 125 pg/ml | 0.344，0.336 | 0.3400 | 0.2440 |
| 62.5 pg/ml | 0.216，0.208 | 0.2120 | 0.1160 |
| 31.25 pg/ml | 0.166，0.178 | 0.1720 | 0.0760 |
| 15.625 pg/ml | 0.130，0.150 | 0.1400 | 0.0440 |
| 0 pg/ml | 0.108，0.084 | 0.0960 | 0.0000 |
试剂盒数据重复性：
选取血清、血浆、细胞上清等不同类型不同浓度的大鼠样本各 8 例做双复孔验证试验，
将检测的 OD 值复孔间 C.V.值统计结果如下：
| 样本类型 | n | C.V. Average | C.V. Range |
| 血清 | 8 | 0.97% | 0.07 - 2.55% |
| 血浆 | 8 | 0.98% | 0.04 - 3.06% |
| 细胞上清 | 8 | 0.83% | 0.05 - 1.23% |
试剂盒数据回归性：
选取血清、血浆、细胞上清等不同类型的大鼠样本按低浓度、中浓度、高浓度分组稀释
做回归性验证试验，将线性回归后的浓度值与理论浓度值相比较统计结果如下：
| 样本类型 | Average Recovery （0-31.25pg/ml） | Average Recovery (31.25-500pg/ml) | Average Recovery (500pg/ml 以上) |
| 血清 | 124.35% | 109.22% | 106.38% |
| 血浆 | 121.58% | 101.62% | 96.18% |
| 细胞上清 | 113.26% | 99.63% | 92.74% |
试剂盒灵敏度：
本试剂盒检测 rat IL-4 的最低浓度为 3.9pg/ml，验证试验选取两条标准品进行梯度稀释
确认 3.9pg/ml 以上浓度的反应孔 OD 值呈正相关线性分布，IL-4 浓度在 3.9-15.6pg/ml 之间 样本可以被检测到但会有较大偏差，低于 3.9pg/ml 无法被检出。
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文献和实验RAT/MOUSE GROWTH HORMONE ELISA KIT
实验原理 This assay is a Sandwich ELISA based, sequentially, on: 1) capture of rat or mouse Growth Hormone molecules from samples to the wells of a microtiter plate coated by a pre-titered amount of anti-Growth Hormone
saline (PBS) (Cat. no. 10010-049) or equivalent Optional: ArC™ Amine Reactive Compensation Bead Kit (Cat. no. A10346) 实验步骤 1. Using the AbC™ anti- Rat/Hamster Bead Kit 1) Completely resuspend the AbC™ RH
RNA was purified using the AllPrep DNA/RNA 96 Kit and analyzed on the Agilent 2100 bioanalyzer. Intact RNA is indicated by a RIN value of close to 10. RNA with no genomic DNA contamination. Total RNA was purified from rat kidney
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