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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 灵敏度：
5.46pg/mL
- 库存：
99
- 供应商：
上海普时如生物科技有限公司
- 检测范围：
5.46-16.38pg/ml
- 检测方法：
酶联免疫吸附测定
- 应用：
仅供科研实验使用，严禁用于临床或其他非科研用途。
- 适应物种：
human(人)
- 标记物：
辣根过氧化物酶（HRP）
- 样本：
血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清
- 规格：
96wells
Human IFN-γ ELISA（即人干扰素-γ酶联免疫吸附检测）是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的IFN-γ（干扰素-γ）的实验室技术。IFN-γ，也被称为II型干扰素，是细胞因子超家族中的重要成员，具有广泛的生物学功能，如抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、调控细胞增殖和分化等。以下是对Human IFN-γ ELISA的详细解析：
一、IFN-γ的基本特性
- 名称与别名：IFN-γ，又称为II型干扰素。
- 分子结构：IFN-γ是由143个氨基酸组成的分泌型糖蛋白，以同源二聚体形式存在，分子量为40 kDa。其生物学作用具有严格的种属特异性。
- 产生细胞：IFN-γ主要由活化的T细胞和NK细胞产生。
- 功能：IFN-γ在抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等方面发挥重要作用，能诱导细胞因子的产生，上调多种膜蛋白的表达，并影响T辅助细胞亚型的发育。
二、Human IFN-γ ELISA的原理
Human IFN-γ ELISA采用双抗体夹心ELISA法检测样品中IFN-γ的浓度。其基本原理如下：
- 捕获抗体预包被：IFN-γ特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上。
- 样品加入与结合：加入标准品或样品时，其中的IFN-γ会与捕获抗体结合，形成免疫复合物。
- 生物素化抗体结合：加入生物素化的抗人IFN-γ抗体后，该抗体与IFN-γ结合，形成夹心的免疫复合物。
- 显色反应：随后加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素（HRP-Streptavidin），由于生物素与链霉亲和素可以特异性地结合，因此HRP会与夹心的免疫复合物连接起来。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。
- 定量检测：通过酶标仪检测450nm处的吸光度值（A450），IFN-γ浓度与A450值呈正比。通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中IFN-γ的浓度。
三、Human IFN-γ ELISA试剂盒的组成与保存
- 预包被板：用于捕获IFN-γ的特异性抗体已预包被的酶标板。
- 样品分析缓冲液、标准品稀释液、标准品、生物素化抗体、辣根过氧化物酶标记Streptavidin、洗涤液、TMB溶液、终止液、封板膜等。
保存条件通常为：除标准品外，其余组分在4℃保存6个月内有效；标准品在4℃保存1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效。
四、注意事项
- 操作时应穿实验服并戴一次性手套，注意适当防护。
- 洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
- 加样过程中须避免气泡的产生。
- 不同批号的试剂盒组份不宜混用。
- 为保证实验的准确性，建议设置重复孔进行检测。
五、应用与限制
Human IFN-γ ELISA试剂盒广泛应用于科研领域，用于检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的IFN-γ浓度。然而，需要注意的是，该试剂盒仅适用于科研用途，不得用于临床诊断或治疗。
总之，Human IFN-γ ELISA是一种高灵敏度、高特异性的定量检测方法，能够准确检测样品中的IFN-γ浓度，为科研工作者提供有力的实验工具。
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