野生型链霉亲和素

品    名：野生型链霉亲和素（wild-type streptavidin, wt-SA）

规    格：1 mg ，10 mg ，100 mg ，500 mg

产品形式：冷冻干粉（5mM  磷酸钾盐缓冲液、海藻糖，pH 8.0）

分 子 量：四聚体 66kDa，单体 16.5 kDa

活    性：≥11U/mg 蛋白（Green 改良法测定）

纯    度：≥95%（SDS-PAGE 检测）

浓度测定：紫外吸收法，消光系数 E(0.1% at 280 nm)=2.543

来    源：大肠杆菌发酵工程菌株

保存条件：-20℃保存

有 效 期：1 年

相关介绍：

链霉亲和素（Streptavidin ，SA）是阿维丁链霉菌（Streptomyces  avidinii）在生长过程中分泌的 一种同型四聚体蛋白。同亲和素一样，一摩尔的链霉亲和素可以结合四摩尔的生物素，与生物素具 有很高的亲和力。由于 SA 不含糖基且等电点接近于中性，因此 SA 在检测应用中具有比亲和素更 低的非特异性结合水平。

该制品已被广泛应用于多种生物技术领域，诸如：包被免疫检测用微孔板，制备 SA 偶联酶制 剂，SA 偶联荧光素、SA 偶联磁珠等，进而参与酶联免疫吸附和酶催化放大实验，免疫组化化学、 生物分子纯化、生物传感器、生物纳米微球、预靶向制药研究和生物芯片被料等。 (该野生型链霉 亲和素不带任何标签，pI：6.1)

使用方法：（仅供参考）

由于产品生产工艺中冻干环节会引入保护剂等，为减少您的实验误差，建议先通过内部检测方 法，产品中蛋白进行准确定量后，再进行后续实验，并按实际情况进行产品用量调整。建议优先选择紫外吸收法进行定量，方法如下：

将样品从低温条件下拿出后，平衡至室温，并擦去瓶外附着的冷凝水，小心打开瓶盖，防止干 粉飞溅损失。用去离子水或缓冲液进行复溶，充分溶解后，稀释至合适浓度，小心移入比色皿中， 以去离子水或缓冲液为空白对照，测定样品在 280 nm 处的吸光值（建议吸光值控制在 0.1-1.5 区间 内），将其代入以下公式计算蛋白质浓度：

式中：C：样品原液的蛋白质质量浓度（mg/mL）

A280nm ：蛋白质溶液在 280nm 处测得的吸光值 N：稀释倍数

E(0.1% at 280nm) ：1 mg/mL 蛋白质的消光系数

例如将本产品冻干粉充分溶解并混匀后，取适量原液稀释 10  倍，测得其在 280  nm 处的吸光值为 0.7629，则原液的蛋白浓度为 10×0.7629/2.543=3 mg/mL。

 

注意事项：

1.  链霉亲和素冻干粉易溶于水，溶解性可达 10 mg / mL  或更高；

2.  建议使用纯水溶解；

3.  如有未溶解物质，建议延长复溶时间。也可以通过离心或其他方式除去不溶物后，再用于后 续实验，不会对总蛋白产生很大的影响。

4.  考虑到蛋白质特殊性，冻干粉建议现用现配，溶解后应避免反复冻融，如需多次使用，建议 按需分装后冻存（-20℃) ;避免在4℃下长期存放。

Lane 1 ：野生型链霉亲和素单体

Lane 2 ：野生型链霉亲和素四聚体

注意：本产品仅限于科研使用。