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Hygromycin B

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  • ¥600
  • 上海莼试
  • CS-01Y72029
  • 国产
  • 2025年07月15日
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      38

    • 英文名

      Hygromycin B

    • CAS号

      31282-04-9

    • 供应商

      上海莼试

    • 保存条件

      Store at -20°C

    • 规格

      10mM (in 1mL Water) 500mg 1g

    本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断!
    产品名称Hygromycin B产品货号CS-01Y72029
    规格10mM (in 1mL Water) 500mg 1gCAS号31282-04-9
    含量>98.00%分子式C20H37N3O13
    分子量527.5用途仅供科研研究使用
    化学性质:        
    产品细节图片1
      
    Hygromycin B规格:10mM (in 1mL Water) 500mg 1g
    CAS:31282-04-9
    别名:N/A
    化学名:(3'R,3aS,4S,4'R,5'R,6R,6'R,7S,7aS)-4-[(1R,2S,3R,5S,6R)-3-amino-2,6-dihydroxy-5-(methylamino)cyclohexyl]oxy-6'-[(1S)-1-amino-2-hydroxyethyl]-6-(hydroxymethyl)spiro[4,6,7,7a-tetrahydro-3aH-[1,3]dioxolo[4,5-c]pyran-2,2'-oxane]-3',4',5',7-tetrol
    分子式:C20H37N3O13

    产品细节图片2
    分子量:527.5
    溶解度:≥ 26.375mg/mL in H2O
    储存条件:Store at -20°C
    General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the   ultrasonic bath for a while.
    Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or   blue ice upon request
    产品描述:
     
    产品细节图片3
     
    Hygromycin B is a selective antibiotic.Antibiotics are a type of antimicrobial used in the treatment and prevention of bacterial infection.Hygromycin B is an antibiotic that is effective on most bacteria, fungi and higher eukaryotes. Hygromycin B has a single binding site within the 30S subunit, which is in consistent with its monophasic effect. The binding site is located in the major groove of the helix with a highly sequence-specific way. Hygromycin B inhibits protein synthesis by inhibiting the translocation step of elongation and causing mistranslation of mRNA in the 70S ribosome [1]. Hygromycin B selectively inhibited activity of the ribosomal ATPase (RbbA) on 70S ribosomes and releases RbbA from 70S ribosomes at physiological concentrations. RbbA enhances the reactivity of A889 and G890 of the 16S rRNA switch helix region. Also, Hygromycin B protects G1494 and A1408 in the decoding region.
    使用方法: 
    产品细节图片4
     
    1. 常用筛选浓度
      注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
      一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
    2. 杀灭曲线的建立
      注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
    1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
    2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
    3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
    4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
    5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
    3. 稳定转染细胞的筛选
    1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
      注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
    2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
    3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
    4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
    5) 之后更换正常培养基培养即可。
    公司正在出售的产品:
     
    产品细节图片5
     
    SPD-473 citrateMifamurtide
    7-Chlorokynurenic acid sodium saltMouse microalbunminuria ELISA Kit,microalbunminuria,MAU;ALB;mALB
    Lanicemine dihydrochlorideMouse Gelsolin ELISA Kit,Gelsolin,Gelsolin
    PSB 069Mouse coagulation factor Ⅶ ELISA Kit,coagulation factor Ⅶ,FⅦ
    Linopirdine dihydrochlorideMouse thrombin-antithrombin complex ELISA Kit,thrombin-antithrombin complex,TAT
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    NNC 711Mouse rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit,rudimental bovine serum albumin check-up,BSA
    GSK1016790A人类似RIKENcDNAA630077B13基因ELISA检测试剂盒
    L-838,417Mouse Visfatin ELISA Kit,Visfatin,Visfatin
    (S)-(-)-Bay K 8644Mouse Endothelial lipase ELISA Kit,Endothelial lipase,EL
    PMPA (NMDA antagonist)Mouse Endothelial nitric oxide synthase ELISA Kit,Endothelial nitric oxide synthase,eNOS
    PPDAMouse Endothelin 1 ELISA Kit,Endothelin 1,ET-1
    Saikogenin DHygromycin BMouse endotoxin ELISA Kit,endotoxin,ET
    TPMPAMouse Brain derived neurotrophic facor ELISA Kit,Brain derived neurotrophic facor,BDNF
    Mouse Immunoglobulin G2 ELISA Kit,Immunoglobulin G2,IgG2Mouse terminal complement complex C5b-9 ELISA Kit,terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9

    蛋白酶抑制剂混合物实验步骤: 
    产品细节图片6
     
    (1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
    (2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
    (3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
    (4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
    (5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
    (6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
    (7)10,000rpm,4℃离心20min
    (8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
    (9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
    (10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
    (11)12,000rpm,4℃离心20 min
    (12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
    (13)加200ul的DEPC处理水溶解
    (14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)


     

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    图标文献和实验
    相关实验
    • Hygromycin B的基本性质和贮存

      ,不溶于非极性溶剂。对金葡菌209P、肺炎杆菌与人型结核杆菌的最小抑菌浓度MIC为25、12.5与1.56μg/ml,对沟端螺旋体、支原体亦有作用。实验室 用的潮霉素一般为潮霉素B(Hygromycin B)。 潮霉素B在20世纪50年代被发现,当时用作动物用药。而现在它仍然作为驱虫抗虫药被加入鸡和猪的饲料中。用于产生潮霉素的吸水链霉菌在1953年被首次从土壤中分离并获得纯培养 。潮霉素B相关的抗性基因发现于20世纪80年代早期。 潮霉素B与大多数氨

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         细胞色素b563 cytochrome b563 亦称细胞色素 b6 。存在于高等植物至藻类的叶绿体中,与类囊体膜结合紧密。含有原正铁血红素,氧化还原 (β带)和 434nm(γ带或 So- ret带)。为发动光合磷酸化的环状电子传递系统的一个成分,可被光化系统Ⅰ所还原和氧化。  

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