- ￥600
- 上海莼试
- CS-01Y72613
- 国产
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
52
- 英文名：
Latrunculin B
- CAS号：
76343-94-7
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
50ug 100ug 250ug 500ug
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
产品描述:
The latrunculins are commonly used to experimentally disrupt the actin cytoskeleton of cells. Latrunculin B causes concentration-dependent changes in cell shape and actin organization. It sequesters G-actin and prevents F-actin assembly. It binds monomeric actin with 1:1 stoichiometry and can be used to block actin polymerization both in vitro and in cells (Kd = 60 nM).[1] The short-term effects of latrunculin B are comparable to those of latrunculin A, although latrunculin B is slightly less potent.[2] However, latrunculin B is gradually inactivated by serum so that induced changes are transient in the continued presence of the compound. For this reason, latrunculin B may have fewer unwanted effects than latrunculin A and may be preferred for short-term studies.
化学性质:
规格：50ug 100ug 250ug 500ug
CAS：76343-94-7
别名：N/A
化学名：4R-[(1R,4Z,8Z,10S,13R,15R)-15-hydroxy-5,10-dimethyl-3-oxo-2,14-dioxabicyclo[11.3.1]heptadeca-4,8-dien-15-yl]-2-thiazolidinone
分子式：C20H29NO5S
分子量：395.5
溶解度：≤25mg/ml in DMSO
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)Latrunculin B实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| 产品名称 | Latrunculin B | 产品货号 | CS-01Y72613 |
| 规格 | 50ug 100ug 250ug 500ug | CAS号 | 76343-94-7 |
| 含量 | >97.00% | 分子式 | C20H29NO5S |
| 分子量 | 395.5 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
The latrunculins are commonly used to experimentally disrupt the actin cytoskeleton of cells. Latrunculin B causes concentration-dependent changes in cell shape and actin organization. It sequesters G-actin and prevents F-actin assembly. It binds monomeric actin with 1:1 stoichiometry and can be used to block actin polymerization both in vitro and in cells (Kd = 60 nM).[1] The short-term effects of latrunculin B are comparable to those of latrunculin A, although latrunculin B is slightly less potent.[2] However, latrunculin B is gradually inactivated by serum so that induced changes are transient in the continued presence of the compound. For this reason, latrunculin B may have fewer unwanted effects than latrunculin A and may be preferred for short-term studies.
化学性质:
规格：50ug 100ug 250ug 500ug
CAS：76343-94-7
别名：N/A
化学名：4R-[(1R,4Z,8Z,10S,13R,15R)-15-hydroxy-5,10-dimethyl-3-oxo-2,14-dioxabicyclo[11.3.1]heptadeca-4,8-dien-15-yl]-2-thiazolidinone
分子式：C20H29NO5S
分子量：395.5
溶解度：≤25mg/ml in DMSO
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)Latrunculin B实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| MK-3328 | ODM-201 |
| 2-Amino-3,4-dimethyl-3H-imidazo[4,5-f]quinoline | Rat Neurotrophin 3 ELISA Kit,Neurotrophin 3,NT-3 |
| [D-Ala2]leucine-enkephalin | Rat Nephrin ELISA Kit,Nephrin,Nephrin |
| ARN-509 | Rat adrenomedullin ELISA Kit,adrenomedullin,ADM |
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| Dynorphin B | Rat neuropeptide Y ELISA Kit,neuropeptide Y,NPY |
| 2,3,4-Tri-O-acetyl-β-D-Glucuronide methyl ester | Rat Nerve growth factor ELISA Kit,Nerve growth factor,NGF |
| Cyproterone Acetate | Rat glial fibrillary acidic protein ELISA Kit,glial fibrillary acidic protein,GFAP |
| Dynorphin A | Latrunculin BRat Neuropathy Target Esterase ELISA Kit,Neuropathy Target Esterase,NTE |
| ITH 12575 | Rat pigment epithelium-derived factor ELISA Kit,pigment epithelium-derived factor,PEDF |
| Rat Tri-iodothyronine ELISA Kit,Tri-iodothyronine,T3 | Rat Tryptophan Hydroxylase ELISA Kit,Tryptophan Hydroxylase,TPH |
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文献和实验相关实验
化，其他已知细胞松弛素 B还可抑制糖的输送，可以考虑细胞松弛素 B与细胞膜间的相互作用。此外还分离出数种具有类似结构和功能的物质，分别命名为细胞松弛素 A、 C、 D、 E、 F。
细胞色素b563 cytochrome b563 亦称细胞色素 b6 。存在于高等植物至藻类的叶绿体中，与类囊体膜结合紧密。含有原正铁血红素，氧化还原 （β带）和 434nm（γ带或 So－ ret带）。为发动光合磷酸化的环状电子传递系统的一个成分，可被光化系统Ⅰ所还原和氧化。
位于 A层以下、 C层以上的某种形式受成土因子的影响而形成的独特层次。一般来说， B层较 A层腐殖质含量少，多呈黄棕至红棕色。在湿润气候条件下有粘土、铁、铝等从 A层淋溶下来，在干燥气候条件下则有盐分从下层上升，两者都在 B层淀积，因此该层也称淀积层（ illuvial horizon）。
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