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- 2025年07月15日
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北京诺博莱德科技有限公司
酶标记抗体，是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。目前较为常用的是将辣根过氧化物酶(HRP)，经过dian酸钠氧化而标记在抗体IgG分子上，而制成HRP—抗体结合物。诺博莱德向用户提供的各类酶标物，均根据本公司建立的改良过dian酸钠氧化法标记而成。每种成品已加入一定浓度的BSA作为稳定剂。产品的工作浓度根据方法不同而别，用前最好-20℃冻存，避免反复化冻。
应用范围：
抗原决定族的抗原性分析鉴定，各种抗原、抗体的定量、定性及定位分析测定等。
工作中易产生的问题：
1.包被抗体或抗原不适，易产生阳性值较小，或产生变异，即跳管现象。
2.用抗血清不纯化，或纯化程度太低的抗体包被，则阳性值较小，或没有阳性梯度。
3.封闭不好或标记物过浓可产生对照较高。
主要性能：
每支0.1ml液体，内含有HRP约200μg/支，IgG约含400μg/支，BSA300μg/支，－20℃保存，稳定一年。4℃保存约3～6个月，1:10稀释，4℃可30天左右。稀释液为：pH7.4 PBST。
工作效价：
直接ELISA法：1:500~1:1000，用TMB作底物(OD450nm)P/N＝2.5～3.0为阳性。
免疫印迹法：1:200～400，免疫组化：1:20～40，斑点免疫1:200~400。
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文献和实验中依次加入 白细胞介素 -1 8 ，再与HRP 标记的羊抗人抗体结合，形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物 ，经过彻底洗涤后 加 底物TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 白细胞介素 -1 8（ IL-1 8） 呈正相关。用酶标仪在 450 nm波长下测定吸光度（ OD 值）， 通过标准曲线 计算样品 中 人白细胞介素 -1 8（ IL-1 8） 含量 。 试剂盒组成
板，制成固相 抗 体，往包被 单抗 的微孔中依次加入 白细胞介素 -1 8结合蛋白（ IL-18BP ） ，再与HRP 标记的羊抗人抗体结合，形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物 ，经过彻底洗涤后 加 底物TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 白细胞介素 -1 8结合蛋白（ IL-18BP ） 呈正相关。用酶标仪在 450 nm波长下测定吸光度（ OD 值）， 通过标准曲线 计算样品 中 人白细胞介素 -1 8结合
PBST（0.05％Tween-20）洗涤孔盘三次2.13加入第二抗体的方式为加入HRP结合的山羊抗兔IgG（H + L）于适当的孔中。2.14孵育孔盘于室温下1小时。2.15用PBST（0.05％Tween-20）洗涤孔盘五次，。2.16加入入150微升底物（OPD，400微克/毫升，0.03％过氧化氢，柠檬酸盐缓冲液）2.17在室温下孵育30分钟。2.18读取450nm的吸光度。
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