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北京诺博莱德科技有限公司
4℃,12个月;细胞溶液;无菌溶液。主要由Dulbecco's PBS、氯化钙、氯化镁、BSA等组成。经高压灭菌处理。
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文献和实验点在于磷酸盐的含量稍低些,根据是否含钙镁分为两种即D-PBS w/钙 & 镁和D-PBS w/o 钙
离心 5 min,弃上清; 用细胞染色 buffer(或含 1%BSA 的 PBS)离心洗涤 1~2 次; 用细胞染色 buffer(或含 1%BSA 的 PBS)调整细胞浓度至 1x107/mL 备用。 e)胶原蛋白酶消化法: 此法适用于分离纤维性组织、上皮及癌组织。钙、镁离子不会抑制消化作用,因此可用PBS或含血清培养基配制以提高细胞成活率。 将组织块用PBS漂洗干净; 将组织置于平皿中,用眼剪刀剪成小颗粒(1~2 mm3); 加入30倍组织量的蛋白酶溶液(0.1~0.3μg/mL
R&D Systems:如何提高MSC的扩增且不损失其分化潜能
培养于盖玻片上的细胞20分钟,然后室温下用含有10%标准驴血清,0.3%Triton X-100和1%BSA的PBS封闭45分钟。封闭后,在2至8℃下用稀释的一抗孵育细胞过夜,然后在室温下的暗室中用NorthernLights-557连接的二抗孵育细胞一个小时。每一个步骤间,细胞用含有0.1%BSA的PBS清洗三次。 成脂分化。按人骨髓间充质干细胞功能鉴定试剂盒的说明书诱导hMSC分化为脂肪细胞,骨细胞或软骨细胞。简而言之,准备完全成脂分化培养基和带有无菌盖玻片的24孔组织
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