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文献和实验相关专题 下面的步骤适用于通过XCell Ⅱ转印系统进行蛋白印记的大部分应用。为达到最佳效果，用户的优化是必要的。 I. 所需材料： •Xcell SureLock™或Xcell Ⅱ™ Mini-Cell以及Blot Module（Cat. Nos. EI10001, EI9001及EI9051）•电泳后的迷你胶（mini-gel）（最大的尺寸9cm*9cm）•预先切割好的印记膜： 硝酸纤维素（Cat. no. LC2000或LC
如何做出稳定可重复、背景干净的 western 条带？掌握这些，屡试不爽
buffer 加入 BCA 工作液或考马 G250 混合看是否产生颜色。测完蛋白含量后，计算含 50～100 ug 蛋白的溶液体积即为上样量（一般 8 cm 宽的迷你胶每个泳道最大能承载的蛋白质量为 150 ug，所以如果从组织提取蛋白的话上样量不宜过大）。网上有人喜欢等质量上样（即每个泳道的上样体积不一但质量一定），也有使用等体积上样（即先把各个样品稀释到某一固定浓度，然后等体积等质量上样，计算上样体积时需包含 loading buffer 的体积）。按分子克隆的说法，还是使用等体积上样比较好。上样总体
Western转膜步骤 下面的步骤适用于通过Xcell Ⅱ转印系统进行蛋白印记的大部分应用。为达到最佳效果，用户的优化是必要的。 I. 所需材料： • Xcell SureLock™或Xcell Ⅱ™ Mini-Cell以及Blot Module（Cat. Nos. EI10001, EI9001及EI9051） • 电泳后的迷你胶（mini-gel）（最大的尺寸9cm*9cm） • 预先切割
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