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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
32
- 英文名:
R 59-022
- CAS号:
93076-89-2
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
1mg 5mg 10mg 50mg
| 产品名称 | R 59-022 | 产品货号 | CS-01Y77387 |
| 规格 | 1mg 5mg 10mg 50mg | CAS号 | 93076-89-2 |
| 含量 | >99.50% | 分子式 | C27H26FN3OS |
| 分子量 | 459.58 | 用途 | 仅供科研研究使用 |

R 59-022规格:1mg 5mg 10mg 50mg
CAS:93076-89-2
别名:
化学名:6-(2-(4-((4-fluorophenyl)(phenyl)methylene)piperidin-1-yl)ethyl)-7-methyl-5H-thiazolo[3,2-a]pyrimidin-5-one
分子式:C27H26FN3OS

分子量:459.58
溶解度:DMF: 20 mg/ml,DMF:PBS(pH7.2) (1:2): 0.25 mg/ml,DMSO: 5 mg/ml,Ethanol: 5 mg/ml
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:

1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:

| Allyl methyl sulfide | Atropine sulfate |
| Escitalopram Oxalate | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶6(GALNT6)检测试剂盒 |
| PE 15 | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶5(GALNT5)检测试剂盒 |
| Zolantidine dimaleate | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶3(GALNT3)检测试剂盒 |
| KP136 (AL136) | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶4(GALNT4)检测试剂盒 |
| AVN-492 | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(GALNT2)检测试剂盒 |
| Pizotifen | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶14(GALNT14)检测试剂盒 |
| Quetiapine D4 fumarate | Testicular Receptor 4(TR4)ELISA Kit |
| 1-Hydroxy-ibuprofen | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶7(GALNT7)检测试剂盒 |
| CCK (26-31) (sulfated) | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶8(GALNT8)检测试剂盒 |
| Semagacestat (LY450139) | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶9(GALNT9)检测试剂盒 |
| VU 0255035 | 多萜醇磷酸-N-乙酰氨基葡萄糖磷酸转移酶1(DPAGT1)检测试剂盒 |
| Cyamemazine | R 59-022多效调节因子1(PLRG1)检测试剂盒 |
| Tetrabenazine | 多型性腺瘤基因样蛋白1(PLAGL1)检测试剂盒 |
| 腭/肺/鼻上皮癌关联蛋白(PLUNC)检测试剂盒 | 多药耐药关联蛋白1(MRP1)检测试剂盒 |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:

(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验网络 九、CD59 CD59是近年(1989)才发现的一种分子量只有18~20kDa的膜性调节蛋白。由Sugita等(1988年)首先描述,曾有不同的名称,如同种限制因子20(homologous restriction factor-20),保护素(protectin)及膜反应性溶破抑制物(membrane inhibitor of reactive
网络 二、p59 fyn 的 1.p59 fyn 的分布和结构 p59 fyn 为非受体PTKs src家庭的一个成员,见于多种细胞中。由于基因拼接的差异产生了两种不同形式的p59 fyn 。一种以高水平表达于大脑中(p59
CD59 分子 CD59 常用单克隆抗体或代号: MEM- 43,YTH53.1;(TAP,Protectin) 主要表达细胞: 广泛 [NL] 分子质量(kDa)和结构: gp18- 20(GPI连接) 功 能: 与CD2结合,结合C8、C9,抑制MAC CD59 Aka protectin Regulates complement mediated cell lysis
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