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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8°C
- 保质期:
1年
- 英文名:
NP-40 lysis buffer, low salt
- 库存:
999
- 供应商:
百生跃
- 规格:
100mL/500mL/1L/250mL
| 规格: | 100mL | 产品价格: | ¥108.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 500mL | 产品价格: | ¥328.0 |
| 规格: | 1L | 产品价格: | ¥508.0 |
| 规格: | 250mL | 产品价格: | ¥228.0 |
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文献和实验,三个一起上 从以上三个结果可以看到,第一种孵育方法抗原得率最高,第三种抗原得率最低。如果靶蛋白丰度较高,第一种和第二种差别并不显著。注意,整个体系选择同样的孵育顺序,以确保结果的重复性。 5、各种 buffer 整个 co-IP 系统,涉及到裂解液,结合液,洗涤液,洗脱液,这4种溶液要如何考量呢? 裂解液---样本质量很大程度受限于裂解液,要考虑其中的去垢剂种类。 非变性裂解液,含有非离子型去垢剂,有助于稳定天然蛋白构象,比如 IP lysis buffer。不建议使用变性裂解液
降解测序。 五、注意事项 细胞裂解采用温和的裂解条件,不能破坏细胞内存在的所有蛋白质-蛋白质相互作用,多采用非离子变性剂(NP40 或 Triton X-100)。每种细胞的裂解条件是不一样的,通过经验确定。不能用高浓度的变性剂(0.2% SDS),细胞裂解液中要加各种酶抑制剂,如商品化的 cocktailer。 使用明确的抗体,可以将几种抗体共同使用。 使用对照抗体: ① 单克隆抗体:正常小鼠的 IgG 或另一类单抗 ② 兔多克隆抗体:正常兔
的RNA操作非常重要。RNase的污染可通过使用RNAZap处理操作环境得到降低。 1. 由组织或细胞裂解液免疫沉淀RNP复合物 (1)可预先UV照射组织和细胞固定RNA/结合蛋白复合物。 (2)使用预先冰浴冷却的PBS洗组织或细胞两次。 (3)将裂解液加入组织样品中进行匀浆(细胞样品匀浆步骤可省略)。裂解液: 25 mmol/L Tris-HClpH7.5,150 mmol/L KCl,2 mmol/L EDTA,0.5%NP40,1 mmol/L NaF,1 mmol/L
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