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-20℃ to -80℃
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12个月
- 英文名:
GRB2 Protein (SH3-2 domain)
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
20 µg
蛋白名称:GRB2 Protein (SH3-2 domain)
蛋白构建:Recombinant human GRB2 SH3-2 domain (153-end) was expressed in E. coli cells using an N-terminal GST tag.
表达宿主:E. coli
蛋白分子量:~33 kDa.
蛋白NP号:NM_002086.5
蛋白氨基酸序列:153-end
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文献和实验获得敲除转化子的概率。 2载体转化和表达比较关键,周期较长,对细胞感受态要求也较高。 3对于真核生物的同源重组基因敲除研究较少:真核生物转化不容易,表达周期长,基因调控复杂,敲除之后不一定出现特定表型。 另外, 也有一些 在同源重组基础上发展起来的新技术 1 Red同源重组系统 Red同源重组系统主要包含3种蛋白质分子,分别称为Exo、Beta和Gam,这三者是λ噬菌体中的高效重组蛋白
了崭新的途径,然而人们在分离纯化时却遇到了意想不到的困难,即这些蛋白质在E.coli中绝大多数是以包涵体形式存在,重组蛋白不仅不能分泌到细胞外,反而在细胞内聚集成没有生物活性的直径约0.1~3.0μm的固体颗粒[1]。自从应用大肠杆菌体系表达基因工程产品以来,人们就一直期望得到高活性、高产量的重组蛋白。不可溶、无生物活性的包涵体必须经过变性、复性才能获得天然结构以及生物活性,因此应该选择一个合适的复性过程来实现蛋白质的正确折叠,获得生物活性,近年来的研究可以使复杂的疏水蛋白、多结构域蛋白、寡聚
、Glu、Ser和Thr的区域,且在该区域附近有某些特定的氨基酸,则该蛋白就会不稳定。这些PEST结构域的磷酸化导致钙的结合能力提高,从而利于钙依赖性蛋白酶对蛋白质的降解。这提示可以在缺乏PEST蛋白裂解系统的E.coli中表达PEST富含蛋白。 减少E.coli中重组蛋白裂解的策略有以下几种:(1)将蛋白质靶向细胞周质或培养基[145,186];(2)在较低的温度下培养细菌[187];(3)选用蛋白酶缺陷的菌株[188];(4)构建N-末端或C-末端融合蛋白[186];(5)将目的基因多拷贝串联
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