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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 供应商:
百生跃
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1380.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1960.0 |
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文献和实验核糖核酸酶保护实验(Ribonuclease protection assay,RPA)是近十年发展起来的一种全新的mRNA定量分析方法。其基本原理是将标记的特异RNA探针(32P或生物素)与待测的RNA样品液相杂交,标记的特异RNA探针按碱基互补的原则与目的基因特异性结合,形成双链RNA;未结合的单链RNA经RNA酶A或RNA酶T1消化形成寡核糖核酸,而待测目的基因与特异RNA探针结合后形成双链RNA,免受RNA酶的消化,故该方法命名为RNA酶保护实验。对于32P标记的探针,杂交
在25℃温育10分钟,然后37℃水浴40~60分钟)。 7.在70℃加热10分钟结束反应,置冰上进行后续实验或冷冻保存。 四、后续实验 1.第一链cDNA的合成产物能够直接用于PCR扩增。 2.第一链cDNA的合成产物能够直接用于第二链合成必须调适为能够使用下列产品: DNA聚合酶 T4 DNA连接酶 核糖核酸酶H S1核酸酶 五、RNA 操作指南 RNA 抽提纯化是分子生物学研究的基本工作内容。但是由于RNA 酶(RNase)的广泛存在和难以灭活的特性
和Hamilton首先发现是~25nt的核糖核酸能特异性抑制具有相应互补序列的基因表达。那么核糖核酸干扰(RNAi)是怎样工作的呢?首先外源导入的双链核糖核酸(dsRNA)被切割为21~23nt的小分子干扰核糖核酸(siRNA)。Dicer, 作为特异性核糖核酸酶家族的一个成员,切割双链核糖核酸为19~23nt小分子干扰核糖核酸(siRNA),这是一个依赖ATP的耗能过程. 切割后的 siRNA具有3'两个核苷酸TT突出末端。然后siRNA结合到核糖核酸酶复合物上形成RNA诱导的基因沉默复合体(RISC,RNA
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