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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 供应商:
百生跃
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1380.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1960.0 |
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文献和实验序列的相互作用;从研究一个目的蛋白与DNA的相互作用,发展到研究两个蛋白与DNA共同结合的相互作用;从研究启动子区域的组蛋白的修饰,发展到研究结合在DNA序列上的蛋白复合物。随着对基因功能研究的不断深入,这项技术正越来越多的被应用于科研的各个领域。目前已经有成熟的ChIP试剂盒出售,如Millipore公司提供的EZ-ChIP试剂盒,使得越来越多的研究者更容易地采用染色质沉淀技术在许多研究领域取得了成功。ChIP技术的原理染色质免疫沉淀技术的原理是:在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联
,而且对结果的分析也需要有一定的经验。对于刚刚开始使用ChIP技术的研究人员来说,使用成熟的商品化试剂盒和相关的技术服务会达到事半功倍的效果,比如Millipore公司的EZ-ChIP试剂盒就是专门为初学者设计的入门产品。下面我们就最基本的实验步骤,实验中的小技巧以及需要注意的问题简单介绍一下。 1. 细胞固定 甲醛能有效的使蛋白质-蛋白质,蛋白质-DNA,蛋白质-RNA交联,形成生物复合体,防止细胞内组分的重新分布。甲醛的交联反应是完全可逆的,便于在后续步骤中对DNA和蛋白质进行分析
抗体通过抗原-抗体反应形成DNA-蛋白质-抗体复合物,然后使用Agarose beads或Magna beads沉淀此复合物,特异性地富集与目的蛋白结合的DN***段。再经过多次洗涤,除去非特异结合的染色质后,用SDS+NaHCO3洗脱免疫沉淀复合物。Magna beads是近年来出现的一种新型beads,它使用方便,不像Agarose beads那样容易破裂,所以在操作过程中更简单,而且免去了离心的步骤,节省不少时间。Millipore公司最新推出的Magna ChIP试剂盒就是采用这种Magna
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