人DNA定向RNA聚合酶i亚基RPA1(POLR1A)ELI

这几类 PCR 技术你知道吗？

transcription，RT）与 PCR，可用于检测单个细胞或少数细胞中少于 10 个拷贝的 RNA 模板。 RNA 扩增包括两个步骤： 在单引物的介导下和逆转录酶的催化下，合成 RNA 的互补 cDNA；加热后 cDNA 与 RNA 链解离，然后与另一引物退火，并由 DNA 聚合酶催化引物延伸生成双链靶 DNA， 最后扩增靶 DNA。 cDNA 第二链的合成方法有以下几种: 1、自身引导法： 合成的单链 cDNA 3' 端能够形成一短的发夹结构，这就为第二链的合成提供了现成的引物，当第一链合成反应

常规PCR技术及几类PCR新技术的介绍

退火，并由DNA聚合酶催化引物延伸生成双链靶DNA， 最后扩增靶DNA。cDNA第二链的合成方法有以下几种: 1、自身引导法 合成的单链cDNA 3'端能够形成一短的发夹结构，这就为第二链的合成提供了现成的引物，当第一链合成反应产物的DNA:RNA杂交链变性后利用大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ Klenow片段或反转录酶合成cDNA第二链，最后用对单链特异性的S1核酸酶消化该环，即可进一步克隆。但自身引导合成法较难控制反应，而且用S1核酸酶切割发夹结构时无一例外地将导致对应于mRNA 5'端序列出现缺失和重排

做好 ChIP 的四个注意事项

相互作用极少发生或不稳定时，这些变量就更为关键。 第 1 步 – 采用对照（实验严谨更可靠） 虽然使用酶消化制备染色质，可以改善 ChIP 操作规程，但合理的对照和高度特异性的抗体也同样重要。在实验操作步骤中添加阳性和阴性对照抗体可确保分析正常进行且结果可靠。 阳性对照 许多市售的试剂盒附带 Rpb1（RNA 聚合酶 II 的最大亚基）的抗体，做为阳性对照抗体。但是，Rpb1 仅在活性转录位点结合，因此，如果要研究的位点是非活性位点，那么 Rpb1