人血小板型磷酸果糖激酶（PFKP）ELISA试剂盒

人类血小板抗原1～4系统基因分型

-Elmer美国）；扩增采用Mastercycler 5330自动循环仪（德国Eppendorf公司），首先，94℃10min,接着94℃1min，67℃2min（HPA-2、4系统，65℃2min）、72℃1min循环30次，最后72℃延伸10min。1.5　扩增产物的检测　取扩增后产物10μl在2%琼脂糖凝胶（含溴乙锭0.5μg/m）中电泳，约30min后在紫外仪上观察电泳条带，以宝丽来快照记录结果。1.6　PCR-ASO　按试剂盒说明书操作，通过ELISA方法进行结果检测。 3、讨论 随着成分

ELISA中的试剂－结合物

在受检标本中不存在相同的酶。另外，它的相应底物易于制备和保存，价格低廉，有色产物易于测定等。 在ELISA中，常用的酶为辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)和碱性磷酸酶(alkaline phosohatase, AP)。在少数商品ELISA试剂中，应用的酶尚有葡萄糖氧化酶、β-D-半乳糖苷酶和脲酶等。 国产ELISA试剂一般都用HRP制备结合物。HRP是一种糖蛋白，含糖量约为18%，分子量为44000，是一种复合酶，由主酶（酶蛋白）和辅基（亚铁

超亲和性的新型亲和标签系统“PA Tag System”

表达。平足蛋白上的血小板凝集因子会和血小板上的C型外源凝集素CLEC-2结合引起血小板凝集，诱发癌细胞进行血行转移6）。为了验证抑制血小板凝集素是否能抑制癌细胞转移，加藤等人进行了抑制人血小板凝集的抗人平足蛋白抗体的建立实验，实验中得到的抗体就是NZ-17）。NZ-1是以人平足蛋白N末端的14个氨基酸残基（EGGVAMPGAEDDVV）对应的合成肽作为抗原建立的，所以NZ-1对人细胞上的平足蛋白有很高的亲和性，而且能够十分有效地抑制人平足蛋白和CLEC-2的结合，有很大可能能够成为抗体