- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y75983
- 国产
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
30
- 英文名：
Diclofenac amide
- CAS号：
15362-40-0
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
50 mg 100 mg 500 mg 1 g
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
化学性质:
Diclofenac amide规格：50 mg 100 mg 500 mg 1 g
CAS：15362-40-0
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C14H9Cl2NO
分子量：278.1
溶解度：DMF: >50mg/mL,DMSO: >40mg/mL,Ethanol: >35mg/mL,PBS (pH 7.2): >9mg/mL
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Diclofenac amide is a prodrug form of the non-steroidal anti-inflammatory drug (NSAID) diclofenac .1 It decreases paw thickness in a rat model of carrageenan-induced paw edema when administered at a dose of 100 μmol/kg and decreases acetic acid-induced writhing in mice at 100 μmol/kg.2 Diclofenac amide has reduced ulcerogenicity in rats compared to diclofenac. It is also a degradation product of diclofenac resulting from photo-transformation or spontaneous cyclization in strongly acidic pH conditions.3,4 Diclofenac amide has been used as a synthetic intermediate in the synthesis of compounds with anticancer activity as well as compounds with COX-1, COX-2, and/or 5-lipoxygenase (5-LO) inhibitory activity.5,61.Santos, J., Moreira, V., Campos, M.L., et al.Pharmacological evaluation and preliminary pharmacokinetics studies of a new diclofenac prodrug without gastric ulceration effectInt. J. Mol. Sci.13(11)15305-15320(2012) 2.Chung, M.C., dos Santos, J.L., Oliveira, E.V., et al.Synthesis, ex vivo and in vitro hydrolysis study of an indoline derivative designed as an anti-inflammatory with reduced gastric ulceration propertiesMolecules14(9)3187-3197(2009) 3.Epold, I., Dulova, N., and Trapido, M.Degradation of diclofenac in aqueous solution by homogeneous and heterogeneous photolysisJ. Environ. Eng. Ecol. Sci.1(3)1-8(2012) 4.Mertz, N., Larsen, S.W., Kristensen, J., et al.Long-acting diclofenac ester prodrugs for joint injection: Kinetics, mechanism of degradation, and in vitro release from prodrug suspensionJ. Pharm. Sci.105(10)3079-3087(2016) 5.Kaur, M., and Singh, P.Targeting tyrosine kinase: Development of acridone - pyrrole - oxindole hybrids against human breast cancerBioorg. Med. Chem. Lett.29(1)32-35(2018) 6.Shaveta, Singh, A., Kaur, M., et al.Rational design, synthesis and evaluation of chromone-indole and chromone-pyrazole based conjugates: Identification of a lead for anti-inflammatory drugEur. J. Med. Chem.77185-192(2014)
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
| 产品名称 | Diclofenac amide | 产品货号 | CS-01Y75983 |
| 规格 | 50 mg 100 mg 500 mg 1 g | CAS号 | 15362-40-0 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C14H9Cl2NO |
| 分子量 | 278.1 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Diclofenac amide规格：50 mg 100 mg 500 mg 1 g
CAS：15362-40-0
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C14H9Cl2NO
分子量：278.1
溶解度：DMF: >50mg/mL,DMSO: >40mg/mL,Ethanol: >35mg/mL,PBS (pH 7.2): >9mg/mL
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Diclofenac amide is a prodrug form of the non-steroidal anti-inflammatory drug (NSAID) diclofenac .1 It decreases paw thickness in a rat model of carrageenan-induced paw edema when administered at a dose of 100 μmol/kg and decreases acetic acid-induced writhing in mice at 100 μmol/kg.2 Diclofenac amide has reduced ulcerogenicity in rats compared to diclofenac. It is also a degradation product of diclofenac resulting from photo-transformation or spontaneous cyclization in strongly acidic pH conditions.3,4 Diclofenac amide has been used as a synthetic intermediate in the synthesis of compounds with anticancer activity as well as compounds with COX-1, COX-2, and/or 5-lipoxygenase (5-LO) inhibitory activity.5,61.Santos, J., Moreira, V., Campos, M.L., et al.Pharmacological evaluation and preliminary pharmacokinetics studies of a new diclofenac prodrug without gastric ulceration effectInt. J. Mol. Sci.13(11)15305-15320(2012) 2.Chung, M.C., dos Santos, J.L., Oliveira, E.V., et al.Synthesis, ex vivo and in vitro hydrolysis study of an indoline derivative designed as an anti-inflammatory with reduced gastric ulceration propertiesMolecules14(9)3187-3197(2009) 3.Epold, I., Dulova, N., and Trapido, M.Degradation of diclofenac in aqueous solution by homogeneous and heterogeneous photolysisJ. Environ. Eng. Ecol. Sci.1(3)1-8(2012) 4.Mertz, N., Larsen, S.W., Kristensen, J., et al.Long-acting diclofenac ester prodrugs for joint injection: Kinetics, mechanism of degradation, and in vitro release from prodrug suspensionJ. Pharm. Sci.105(10)3079-3087(2016) 5.Kaur, M., and Singh, P.Targeting tyrosine kinase: Development of acridone - pyrrole - oxindole hybrids against human breast cancerBioorg. Med. Chem. Lett.29(1)32-35(2018) 6.Shaveta, Singh, A., Kaur, M., et al.Rational design, synthesis and evaluation of chromone-indole and chromone-pyrazole based conjugates: Identification of a lead for anti-inflammatory drugEur. J. Med. Chem.77185-192(2014)
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| Fmoc-Thr(tBu)-ol | AP-III-a4 hydrochloride |
| (2R)-Glycerol-O-β-D-galactopyranoside | 淋巴细胞功能相关抗原2(LFA-2/CD2)检测试剂盒 |
| 8-Aminopyrene-1,3,6-trisulfonic Acid (sodium salt) | 淋巴毒素α(LTA)检测试剂盒 |
| Glycerophospho-N-Oleoyl Ethanolamine | 亮氨酰-半胱氨酰氨肽酶(LNPEP)检测试剂盒 |
| Velagliflozin | 亮脑啡肽(LEK)检测试剂盒 |
| Esculin (hydrate) | 亮氨酰氨基肽酶(LAP)检测试剂盒 |
| Ethylenediaminetetraacetic acid trisodium salt | 亮氨酸富含重复丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶2(LRRK2)检测试剂盒 |
| 19R(20S)-EpDPA | Mouse CXC-chemokine receptor 3, CXCR3 Elisa Kit |
| SR 1824 | 淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)检测试剂盒 |
| BI 689648 | 淋巴细胞抗原6复合物基因座A(Ly6a)检测试剂盒 |
| (±)-N-3-Benzylnirvanol | 淋巴细胞因子检测试剂盒 |
| 24-dehydro Cholesterol | 磷酸甘油酸变位酶2(PGAM2)检测试剂盒 |
| Hydroxy Pioglitazone | Diclofenac amide磷酸化cAMP反应元件结合蛋白1(pCREB1)检测试剂盒 |
| N-Acetylprocainamide (Acecainide) | 磷酸化蛋白激酶B(P-PKB)检测试剂盒 |
| 磷酸化肌球蛋白轻链(PMLC)检测试剂盒 | 磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)检测试剂盒 |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验相关实验
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