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- 上海莼试
- CS-01Y76060
- 国产
- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
57
- 英文名：
C18 Galactosylceramide-d35 (d18:1/18:0-d35)
- CAS号：
145176-92-7
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
5 mg
| 产品名称 | C18 Galactosylceramide-d35 (d18:1/18:0-d35) | 产品货号 | CS-01Y76060 |
| 规格 | 5 mg | CAS号 | 145176-92-7 |
| 含量 | >99.00% | 分子式 | C42H46D35NO8 |
| 分子量 | 763.3 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
C18 Galactosylceramide-d35 is intended for use as an internal standard for the quantification of C18 galactosylceramide by GC- or LC-MS. C18 Galactosylceramide is a naturally occurring sphingolipid that has been found in the cerebellum of rats and humans.1,2 It is selectively localized with cholesterol over potassium, sodium, or phosphocholine in rat cerebellum white matter.1 [Matreya, LLC. Catalog No. 1914]1.Brner, K., Nygren, H., Hagenhoff, B., et al.Distribution of cholesterol and galactosylceramide in rat cerebellar white matterBiochem. Biophys. Acta.1761(3)335-344(2006) 2.Boutin, M., Sun, Y., Shacka, J.J., et al.Tandem mass spectrometry multiplex analysis of glucosylceramide and galactosylceramide isoforms in brain tissues at different stages of Parkinson DiseaseAnal. Chem.88(3)1856-1863(2016)
化学性质:
规格：5 mg
CAS：145176-92-7
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C42H46D35NO8
分子量：763.3
溶解度：Chloroform: soluble,Chloroform:Methanol (2:1): soluble,Ethanol: heated
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)C18 Galactosylceramide-d35 (d18:1/18:0-d35)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| Prunin | GSK2850163 hydrochloride |
| Doxorubicin | 真核起始因子4A - II(EIF4A2/DDX2B/EIF4F)检测试剂盒 |
| JTE 607 dihydrochloride | 张力蛋白4(TNS4)试剂盒ELISA |
| Calcium Levofolinate | 粘蛋白2(MUC2)检测试剂盒 |
| LMP744 hydrochloride (MJ-III65 hydrochloride) | 粘蛋白3(MUC3)ELISA检测试剂盒 |
| Aclacinomycin A hydrochloride | 增殖诱导配(APRIL)试剂盒ELISA |
| 5’-O-DMT-N4-Ac-2’-F-dC | 早期生长反应因子1(EGR1)检测试剂盒elisa |
| LSN3106729 hydrochloride | Carnosine Dipeptidase 2(CNDP2)ELISA Kit |
| 4μ8C | 真核细胞延伸因子2(eEF2)检测试剂盒elisa |
| DNA31 | 整合素A5(ITGA5)试剂盒ELISA |
| Aldoxorubicin | 整合素α2(ITGA2)检测试剂盒 |
| L-Thyroxine-13C9,15N | 整合素α4(ITGA4/CD49D)ELISA检测试剂盒 |
| BMS 195614 | C18 Galactosylceramide-d35 (d18:1/18:0-d35)整合素αⅤβ3(ITG αⅤβ3)试剂盒ELISA |
| Hydroflumethiazide-13C-d2 | 整合素αM型(ITG αM/CD11b) 检测试剂盒 |
| 脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)检测试剂盒 | 整合素β4结合蛋白(ITGB4BP)检测试剂盒elisa |
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文献和实验Conjugation of 5′‐Functionalized Oligodeoxyribonucleotides with Properly Functionalized Ligands
Reversed‐phase column: 125‐mm × 4‐mm, 5‐µm Lichrospher 100 RP18 (Merck), CC Nucleosil 100‐5 C18 (125/4; Macherey‐Nagel), or polystyrene reversed‐phase (PRP‐1; Hamilton)
相应具有良好的惰性；流动相必须预先用固定相饱和，以减少固定相从担体表面流失；温度的变化和不同批号流动相的区别常引起柱子的变化；另外在流动相中存在的固定相也使样品的分离和收集复杂化。由于涂布式固定相很难避免固定液流失，现在已很少采用。现在多采用的是化学键合固定相，如C18、C8、氨基柱、氰基柱和苯基柱。 液液色谱法按固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC)。 正相色谱法 采用极性固定相（如聚乙二醇、氨基与腈基键合相）；流动相为相对非极性的疏水性溶剂
异构体。 2．液液色谱法 使用将特定的液态物质涂于担体表面，或化学键合于担体表面而形成的固定相，分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离。分离过程是一个分配平衡过程。 涂布式固定相应具有良好的惰性；流动相必须预先用固定相饱和，以减少固定相从担体表面流失；温度的变化和不同批号流动相的区别常引起柱子的变化；另外在流动相中存在的固定相也使样品的分离和收集复杂化。由于涂布式固定相很难避免固定液流失，现在已很少采用。现在多采用的是化学键合固定相，如C18、C8、氨基柱、氰基柱和苯基
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